一种胶类中药及其制品中马种和骡种源性成分的检测方法

摘要

本发明涉及一种胶类中药及其制品中马种和骡种源性成分的检测方法，本发明基于马种及骡种胶原蛋白序列中包含其专属性寡肽Gly-Ala-Ser-Gly-Pro-Ala-Gly-Val-Arg，经限制性内切酶酶切从胶原蛋白中游离出，然后采用液相色谱-串联质谱对胶类中药及其制品进行检测。该方法具有特征性强，灵敏度高，操作简单，可对胶类中药及其制品中是否混有马种及骡种源性成分进行鉴定。

主权项

一种胶类中药及其制品中马种和骡种源性成分的检测方法，包括下列步骤：(1)将胶类中药或其制品用pH8.0、质量分数为1％NH₄HCO₃溶液溶解，或提取其中的蛋白多肽类成分用pH8.0、质量分数为1％NH₄HCO₃溶液溶解，加入胰蛋白酶或精氨酸酶进行酶切；(2)放入液质联用仪，以待检测的阴性样品为基质，加入寡肽Gly‑Ala‑Ser‑Gly‑Pro‑Ala‑Gly‑Val‑Arg或马皮胶纯品或骡子皮胶纯品作为对照，选择该寡肽的母离子双电荷m/z386.4或单电荷771.8进行监测；或采用二级质谱模式选择该寡肽的母离子m/z386.4及其子离子的离子对进行监测；如果检出该离子的保留时间与对照品一致，且其子离子与对照品的子离子一致，则所述中药或其制品含有马种或骡种源性成分；如果没有与对照品保留时间一致的该离子，则不含有马种或骡种源性成分。