一种家禽原始生殖细胞的尼罗红染色方法

摘要

本发明公开了一种家禽原始生殖细胞的尼罗红染色方法，步骤为：将尼罗红/甲醇溶液用不含钙镁离子的PBS稀释后，加入PGCs细胞中，吹打形成悬浮的单个细胞，室温避光染色5-10min；然后离心取沉淀以不含钙镁的PBS清洗；最后加入稀释后的Hoechst 33342溶液，室温避光染色2min，即完成对原始生殖细胞的染色；本发明首次将尼罗红染料用于鉴定原始生殖细胞，弥补了现有鉴定方法试剂价格昂贵、操作时间长、实验结果不稳定等缺陷，适用于固定的原始生殖细胞和活的原始生殖细胞，染色步骤简单、快速，染色效果稳定，可重复性高，宜广泛推广应用。

主权项

一种家禽原始生殖细胞的尼罗红染色方法，其特征在于，步骤如下：（1）将1mg/mL的尼罗红/甲醇溶液用不含钙镁离子的PBS稀释100倍后，加入PGCs细胞中，吹打形成悬浮的单个细胞，接着室温避光染色5‑10 min；（2）1500 rpm离心5分钟，取沉淀以不含钙镁的PBS清洗；（3）将Hoechst 33342溶液用不含钙镁的PBS稀释至10μg/ml，加入沉淀中，室温避光染色2 min，即完成对原始生殖细胞的染色。