一种雌酮分子印迹电化学发光传感器的制备方法及应用

摘要

本发明公开一种雌酮分子印迹电化学发光传感器的制备方法及应用。采用Nafion作为阳离子交换剂和MWCNT对三联吡啶钌静电吸附作用以及溶胶凝胶法制备成分子印迹电化学发光传感器，实现了对雌酮的高灵敏度和选择特异性检测分析，有效克服目前检测雌酮方法的不足，对环境检测具有重要的科学意义和应用价值。本发明不仅能有效减少复杂样品中基质的干扰，提高检测雌酮的技术可靠性，同时相比于其他的免疫法、电化学方法，该方法操作简便、检测时间短并且成本更低以及检测灵敏度更高。

主权项

一种雌酮分子印迹电化学发光传感器的制备方法，包括如下步骤：(1) 在离心管中分别加入四乙氧基硅烷、甲基甲氧基硅烷、苯基甲氧基硅烷、无水乙醇、浓度为0.05~0.2 mol/L的盐酸和超纯水组成溶胶混合液，所述的四乙氧基硅烷、甲基甲氧基硅烷、苯基甲氧基硅烷、无水乙醇、浓度为0.05~0.2 mol/L的HCl、超纯水的体积比为：20:6:4:20:1:20~20:6:8:20:1:20，混悬后得到均一、透明的溶胶‑凝胶，得到的溶胶‑凝胶即为非分子印迹聚合物；(2) 在上述非分子印迹聚合物中加入50~150 mg/L的雌酮溶液，混悬后形成分子印迹聚合物，所述的非分子印迹聚合物与雌酮溶液的体积比为5:1~15:1，在干燥条件下室温存放；(3) 称取MWCNT加入浓硫酸和浓硝酸的混合液中，所述MWCNT与浓硫酸和浓硝酸的混合液的比例为8mg/12mL~15 mg/12mL，所述浓硫酸与浓硝酸的体积比为2:1~5:1，所述浓硫酸的浓度为16.0~18.4 mol/L，所述浓硝酸的浓度为14~16 mol/L；在70~100 ℃加热回流后，用纯水反复洗至中性，用纤维滤纸抽滤，40~60 ℃真空干燥箱烘干，得到端基羧酸化的MWCNT，红外灯下研磨成粉状储存；(4) 称取步骤（3）酸处理后的端基羧酸化的MWCNT加入二甲亚砜，超声分散后得到均一、稳定的端基羧酸化的MWCNT悬浊液；(5)称取三联吡啶钌固体至超纯水中溶解配制成1~2 mmol/L Ru(bpy)₃²⁺溶液；(6)在金电极表面滴2~3 μL的全氟化树脂溶液，待其室温晾干后制成Nafion电极，再滴4~6 μL步骤（4）制备的端基羧酸化的MWCNT悬浊液，室温晾干制备成MWCNT/Nafion电极，将该电极置于步骤（5）配制的Ru(bpy)₃²⁺溶液中浸泡30~40 min后取出，用超纯水将表面未吸附的Ru(bpy)₃²⁺溶液冲洗干净，室温晾干，得到Ru(bpy)₃²⁺/MWCNT/Nafion固相发光电极；(7) 在步骤（6）制备成Ru(bpy)₃²⁺/MWCNT/Nafion固相发光电极上滴8~10 μL步骤（2）制得的分子印迹聚合物，室温晾干，将晾干后的电极置于40~50 ℃超纯水中磁力搅拌洗脱以去除模板分子雌酮，得到分子印迹电化学发光传感器。