一种红掌脱毒培养的方法

摘要

本发明涉及植物组织培养技术领域，为解决红掌脱毒组培苗生产存在的操作难度大、脱毒效率低、生产周期长等问题，本发明提出一种红掌脱毒培养的方法，外植体准备、诱导培养、增殖培养、变温热处理、分化培养、准脱毒母株诱导培养、准脱毒母株增殖和分化、准脱毒株系生长、病毒检测、脱毒材料增殖分化、脱毒苗壮苗生根，本方法是一种操作简便、脱毒材料获得率高、速度快的红掌种苗脱毒培养方法。

主权项

一种红掌脱毒培养的方法，其特征在于，所述脱毒培养的方法为以下步骤：（1）外植体准备：取红掌叶及叶柄，经灭菌处理，作为组培用的外植体；（2）诱导培养：将步骤（1）的外植体切段或切片接种在诱导培养基上，经50~90天诱导出愈伤组织；（3）增殖培养：将步骤（2）愈伤组织接种在增殖培养基上，增殖继代数次；（4）变温热处理：将步骤（3）增殖培养后的愈伤组织先置于38～36℃环境中8～12小时，再置于32～26℃环境中16～12小时，再回到38~36℃环境，如此循环 25~35天；（5）分化培养：将经步骤（4）处理后成活的愈伤组织接种到分化培养基上分化出苗；（6）准脱毒母株诱导培养：将步骤（5）分化出的苗作为准脱毒母株切去根部，每株单独接种到增殖培养基上；（7）准脱毒母株增殖和分化：将步骤（6）准脱毒母株基部产生的愈伤组织增殖继代，增殖后将愈伤组织任意分割成两部分，其中一部分增殖继代，另一部分接种到到分化培养基上，每株产生的愈伤单独接种并标记；（8）准脱毒株系生长：将步骤（7）愈伤组织在分化培养基上长出的小植株按株系分别转接到壮苗生根培养基培养；（9）病毒检测：对步骤（8）的组培苗按株系分别进行病毒检测；（10）脱毒材料增殖分化：将经步骤（9）检测为脱毒苗的株系对应的愈伤组织进行增殖培养和诱导分化出苗；（11）脱毒苗壮苗生根：将步骤（10）脱毒愈伤组织上长出的组培苗转入壮苗生根培养基，待苗高3～4厘米时出瓶种植于大棚，得到红掌脱毒组培苗。