细胞胞内氨基酸代谢轮廓分析方法

摘要

本发明公开了一种针对少量细胞(10³-10⁴个)的胞内代谢轮廓高通量分析方法，包括简便、高效的细胞淬灭及代谢物提取，代谢物衍生化，以及质谱检测等步骤。本发明公开的胞内代谢轮廓高通量分析方法具有简便快速，灵敏度高且重复性好的特点，适合于96孔板内培养的细胞以及收获量少的细胞的代谢组高通量分析，如药物的大规模筛选、评价以及干细胞研究等。

主权项

细胞胞内氨基酸代谢轮廓分析方法，所述方法包括：(a)取洗去培养基的细胞，利用冷甲醇水溶液对细胞进行代谢淬灭和低温静置提取，离心或过滤，得细胞胞内代谢物提取液；(b)采用丹磺酰氯作为衍生化试剂，对提取液中含氨基及酚羟基代谢物进行衍生，终止衍生后，离心或过滤，收集衍生后的溶液；(c)采用液相色谱‑质谱联用的方法，在正离子模式下对衍生后溶液中的细胞胞内代谢物进行检测。