一种利用酶-化学法定向制备1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯的方法

摘要

本发明公开了一种利用酶-化学法定向制备1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯的方法，首先以甘油为起始原料，搅拌条件下，与油酸在反应的温度下溶解，加入游离或固定化的脂肪酶做催化剂，进行选择性酯化反应，得到1,3-位甘油二酯；再将得到的甘油二酯与棕榈酸或棕榈酸衍生物反应，得到1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯的粗产品；最后通过分子蒸馏，得到所述的1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯。本发明通过筛选特定的脂肪酶用于1,3-DAG的制备，获得1,3-DAG的含量为90％以上，收率达到90％以上；最终获得的1,3-二油酸-甘油二酯的含量高达95％,收率达到95％以上。

主权项

一种利用酶‑化学法定向制备1,3‑二油酸‑2‑棕榈酸甘油三酯的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将摩尔比为2.0～2.2:1的油酸和甘油加入反应器，搅拌条件下加热至35℃～65℃，加入脂肪酶，在真空度为300～500Pa下进行酯化反应，直至体系中油酸含量<0.5％，经过滤得到1,3‑二油酸甘油二酯；(2)将步骤(1)得到的1,3‑二油酸甘油二酯、三乙胺和溶剂混合，搅拌冷却至0～6℃，再加入棕榈酸或棕榈酸衍生物，保温反应1～5h后，升温至室温后继续反应，直至1,3‑二油酸甘油二酯的转化率>97％，再经过滤、洗涤、干燥得到1,3‑二油酸‑2‑棕榈酸甘油三酯的粗品；所述的三乙胺与1,3‑二油酸甘油二酯的摩尔比为1～2:1；所述的棕榈酸或棕榈酸衍生物与1,3‑二油酸甘油二酯的摩尔比为1～1.5:1；(3)将步骤(2)得到的粗品进行分子蒸馏，得到所述的1,3‑二油酸‑2‑棕榈酸甘油三酯；所述的脂肪酶为LipSM54、Lipolase Ultra或LipPA99；LipSM54为游离脂肪酶，制备方法具体为：将保藏号为CGMCC No.4254的寡养单胞菌加入到培养基中进行发酵培养，将发酵液冷冻干燥制得所述的LipSM54脂肪酶；脂肪酶LipPA99的制备方法具体为：将保藏号为CGMCC No.4405的产碱假单胞菌加入到培养基中进行发酵培养，所述产碱假单胞菌相对于培养基的接种量为体积百分比计1～10％，发酵时间为12～48h，温度为15～50℃，再将发酵液冷冻干燥制得所述的LipPA99脂肪酶；所述的棕榈酸衍生物是指棕榈酸酐或棕榈酸酰氯。