一种含有角质细胞生长因子KGF2的植物油体

摘要

本发明公开了一种含角质细胞生长因子KGF2的油体，利用重组DNA技术将KGF2基因插入以pCAMBIA1301质粒为基本骨架改造的植物特异表达载体pOBT，构建了植物油体特异表达KGF2植物表达载体pOBT-KGF2，转化至油料作物中，大量表达了角质细胞生长因子KGF2，提取含油体蛋白与KGF2的融合表达产物的油体，可直接作为活性成分用于医药领域和日化领域生产，简化了以往角质细胞生长因子KGF2提取，以及与乳化剂（或保护剂）混合的加工工艺，降低了生产成本。

主权项

一种表达载体质粒pOBT‑ KGF2，它是由下述方法制备的：1）pCAMBIA1301为基本骨架，将其T‑DNA区进行改造，除了保留有T‑DNA区的NOS基因外其余基因均被35S和Bar基因替换，以pEGAD质粒为模板，利用35S‑F上游引物CGGGGTACCATCCGTCAACATGGTGGAGCACGACACGCTTGTCTACT和Bar‑R下游引物CGGAATTCACTAGTTCAGATCTCGGTGACGGGCAGGACCGGACGGGGCGGAACC进行PCR，扩增得到35S‑Bar基因，利用kpnI和SpeI酶切位点将其插入到pCAMBIA1301载体T‑DNA区的NOS基因前，构建了p1301‑35S‑Bar‑NOS基本质粒，简写为pO质粒；2）用pstI和NcoI分别酶切并连接pO质粒和序列表SEQ ID NO.2所示基因，得中间载体pOB；3）用HindⅢ和kpnI分别酶切并连接中间载体pOB和序列表SEQ ID NO.3所示基因，得植物特异表达载体pOBT；4）用NcoI与HindⅢ分别酶切并连接植物特异表达载体pOBT和序列表SEQ ID NO.5所示基因，得表达载体质粒pOBT‑ KGF2。