CE-TOF/MS法测定人体血浆和尿中马钱子碱和士的宁含量的方法

摘要

本发明公开了一种CE-TOF/MS法测定人体血浆和尿中马钱子碱和士的宁含量的方法，以盐酸小檗碱为内标，在最佳优化条件下，各组分分离好，方法灵敏度较高。与LC-MS方法相比较，本申请的CE-TOF/MS法在能够达到相当灵敏度的同时，还改善了组分之间的分离，减少有机溶剂的使用量；与HPLC、CE-DAD方法相比较，本申请不仅灵敏度提高，而且还能够提供检测组分的精确分子量，可以实现对未知组分的定性。

主权项

一种CE‑TOF/MS法测定人体血浆和尿中马钱子碱和士的宁含量的方法，其特征在于，测试条件如下：1)CE分离条件CE背景缓冲液：30mM的乙酸铵溶液，pH＝8.40；进样方式：压力进样，0.5psi×10s；有机调节剂：体积比为10％的乙腈；运行电压：反向25kV；2)TOF/MS检测条件鞘流液：由49.75％的去离子水、49.75％的异丙醇和0.5％的甲酸组成，v/v；雾化气压力：0.4Bar干燥气流速：4L/min；干燥气温度：200℃；其中，内标为盐酸小檗碱溶液；马钱子碱和士的宁样品在测试前选用固相萃取法作前处理，活化平衡固相萃取小柱后即可按照以下步骤进行：1)上样：取酸化过的尿样和血浆样品1mL直接上样；2)清洗：对尿样，依次用含5％的甲酸的0.1M盐酸水溶液、纯甲醇清洗；对血浆样，依次用2％的甲酸水溶液和1mL的纯甲醇清洗；3)洗脱：血浆和尿样的洗脱采用5％氨水的甲醇溶液；4)富集：60℃下氮气流缓缓吹干，吹干前先加入1％的盐酸水溶液；吹干后用样品溶剂复溶样品，以备进样分析。