富集原始转录本信息的RNA文库的构建方法及其应用

摘要

本发明提供了一种利用RNase H有选择性地去除大量rRNA以及血液球蛋白以获得高质量的富集原始转录本信息的RNA文库的构建方法及其应用。用本发明方法构建的RNA文库不仅具有极低rRNA残余量(仅为常规oligo(dT)方法残留量约1/500)，而且具有极高的基因覆盖率。

主权项

一种富集原始转录本信息的RNA文库的构建方法，其特征在于，包括步骤：(i)提供分离的总RNA样本；(ii)用针对目标RNA的反义DNA探针对所述的总RNA样本进行退火处理，从而获得含RNA:DNA退火产物的混合物；其中，所述的目标RNA选自下组：核糖体RNA、线粒体mtrRNA、球蛋白RNA；(iii)对上一步骤中的所述的混合物，用专一性降解RNA:DNA退火产物的核酸酶进行消化，从而获得经消化的混合物；(iv)将上一步骤获得的所述经消化的混合物作为RNA文库构建材料，构建获得RNA文库。