发明名称 一种测序模板的制备方法
摘要 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种测序模板的制备方法。包括以下步骤:emPCR扩增混合液的准备、DNA文库的捕获、乳化、emPCR扩增、DNA文库微球的富集回收。由本发明制备得到的测序模板,体系稳定性高,乳液体系液滴中,单克隆的含量比例高,磁珠富集效率高,用于基因组测序的速度和精度优于现有技术。
申请公布号 CN104830841B 申请公布日期 2016.04.20
申请号 CN201510300251.6 申请日期 2015.06.04
申请人 北京中科紫鑫科技有限责任公司 发明人 蔡亦梅;高静;徐潇;吴超;张睿;王者馥;王绪敏;殷金龙;任鲁风
分类号 C12N15/10(2006.01)I 主分类号 C12N15/10(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种测序模板的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:⑴.emPCR扩增混合液的准备;⑵.DNA文库的捕获;⑶.乳化;⑷.emPCR扩增;⑸.DNA文库微球的富集回收;其中,所述乳化过程采用TissueLyser于20Hz破碎4分钟;所述乳液PCR的反应体系中包括水相、油相、引发剂、保护剂、表面活性剂与助表面活性剂,并且所述水相与油相的体积比为4:9‑4:7;所述油相为DC5225C、PGFE、DC193、DC556和矿物油中的两种或几种。
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