一种基于氨基酸的烟草代谢组学中新鲜烟叶样品质量的判别方法

摘要

本发明提供了一种对烟草代谢组学烟草鲜叶样本质量进行判别的方法。以烟草鲜叶中谷氨酸与谷氨酰胺含量的比值为指标，对代谢组学烟草鲜叶样本质量进行判别，为代谢组学合格样本的选择提供依据。本发明准确可靠，简单可行，可为烟草代谢特征分析及相关烟草代谢组学研究提供借鉴。

主权项

一种对代谢组学研究中的烟草鲜叶样本质量进行判别的方法，其特征在于：通过检测烟草鲜叶中谷氨酸与谷氨酰胺含量，计算其比值，对代谢组学研究中的烟草鲜叶样本质量进行判别；其具体方法为：将烟草鲜叶中加入含内标的提取溶剂，提取后离心过滤，采用6‑氨基喹啉‑N‑琥珀酰亚胺甲酯(AQC)衍生后，利用超高效液相色谱‑单四级杆质谱(UPLC‑SQDMS)进行分析，通过标准曲线计算得出谷氨酰胺和谷氨酸的含量；超高效液相色谱‑单四级杆质谱(UPLC‑SQDMS)的条件为：色谱柱Waters UPLC C18column；流动相中的液体均按体积百分比，流动相A：20mM甲酸铵，0.5％甲酸，1％乙腈，98.5％水，流动相B：1.6％甲酸，98.4％乙腈；流速：0.35mL/min；柱温：55℃；进样体积：1μL；进样器温度：15℃；洗脱梯度为：0‑1.08min，0.1％‑0.1％B；1.08‑11.48min，0.1％‑9.1％B；11.48‑16.3min，9.1％‑21.2％B；16.3‑16.9min，21.2％‑59.6％B；16.9‑18.1min，59.6％‑59.6％B；18.1‑18.28min，59.6％‑0.1％B，18.28‑20min，0.1％‑0.1％B；质谱方法：ESI正离子模式下，分段SIR扫描，毛细管电压：3KV，锥孔电压：30V，脱溶剂气温度：300℃，锥孔温度：120℃，脱溶剂气流量：650L/h，锥孔气流量：50L/h；以谷氨酸与谷氨酰胺含量的比值为指标，建立区分代谢组学正常样本、部分褐化及褐化样本的标准，即待测样本中谷氨酸与谷氨酰胺比值在0.67以上的为合格样本，用于烟草代谢组学分析；谷氨酸与谷氨酰胺比值在0.12以下的为变质的不合格样本，谷氨酸与谷氨酰胺比值介于0.12与0.67之间为部分质变的不合格样本。