发明名称 快速鉴定茎瘤芥杂交种纯度的方法
摘要 本发明公开一种采用特异性引物快速鉴定茎瘤芥杂交种纯度的方法,从600对芸薹属花科SSR共同引物中筛选出在杂交种亲本多态性良好的引物,进一步对茎瘤芥杂交种涪杂1号-8号及其亲本筛选,最终筛选出两条引物SSR Na14-G06和SSR Ol11-G11,对茎瘤芥的特异性强,该两条引物结合引物SSR Ol13-E03能较好的分辨出“涪杂1号-8号”杂交种与亲本条带以及杂交种中混有的油菜、白菜和儿菜等杂株,具体包括:应用改良CTAB快速法提取茎瘤芥杂交种DNA;用筛选出的引物对杂交种DNA模板进行PCR扩增;对扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,准确率高,大大缩短了茎瘤芥杂交种纯度的鉴定周期,具有较强的实用性。
申请公布号 CN105506113A 申请公布日期 2016.04.20
申请号 CN201610002597.2 申请日期 2016.01.06
申请人 重庆市渝东南农业科学院 发明人 沈进娟;刘雪姣;冉广葵;杨仕伟;于晓虎;冷容;范永红;曾胜;李娟
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 重庆强大凯创专利代理事务所(普通合伙) 50217 代理人 黄书凯
主权项 快速鉴定茎瘤芥杂交种纯度的方法,包括DNA提取、PCR扩增步骤,其特征在于:所述的PCR扩增步骤中的PCR反应体系中包括以下序列的引物:SSR Na14‑G06正义链序列:AAACGGCTTGCATTGTTCTC;反义链序列:GGCTTGCTTGATCCAGTCTC;SSR Ol11‑G11正义链序列:GTTGCGGCGAAACAGAGAAG;反义链序列:GAGTAGGCGATCAAACCGAG;SSR Ol13‑E03 正义链序列:CTCTGTTTCCTCTGCCCAAC;反义链序列:AGGGAAGGAAAGGACACGAC中的其中任意两种组合。
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