一种黑尾近红鲌精子保存方法

摘要

本发明公开了一种黑尾近红鲌精子保存方法，（1）精子保存液的制备：按配比称取各原料成分，用蒸馏水分别进行溶解，混合均匀，加蒸馏水定容；（2）精液采集：用毛巾擦干成熟黑尾近红鲌雄鱼并排除尿液和粪便，避免精液污染；轻压腹部，用吸管收集挤出的精液，采集过程避免阳光或紫外线照射；（3）精液存放：将采集的黑尾近红鲌精液置于经灭菌消毒的干燥、洁净且密封的容器中，采集结束后将盛有精液和保存液的容器置低温避光保存。本发明通过以上技术方案，能有效延长黑尾近红鲌精子体外存活时间，保持其受精活力，实现黑尾近红鲌的保护性开发和远缘杂交育种。该方法成本低廉、简短易操作，有效保存时间长，具有重要的应用价值。

主权项

一种黑尾近红鲌精子保存方法，其特征在于，具体步骤如下：（1）精子保存液的制备：按配比称取各原料成分，用蒸馏水分别进行溶解，混合均匀，加蒸馏水定容至100 mL；精子保存液采用如下配方中的一种进行配制：A₁保存液配方：NaCl 0.80g，KCl 0.04g，CaCl₂ 0.01g，MgSO₄·7H₂O 0.02g，NaHCO₃ 0.04g，Na₂HPO₄·H₂O 0.02g，KH₂PO₄ 0.01g，C₆H₁₂O₆·H₂O 0.10g，蒸馏水定容至100mL；A₂保存液配方：NaCl 0.80g，KCl 0.04g，CaCl₂ 0.01g，MgSO₄·7H₂O 0.02g，NaHCO₃ 0.04g，Na₂HPO₄·H₂O 0.02g，KH₂PO₄ 0.01g，C₆H₁₂O₆·H₂O 0.10g，青霉素200×10⁴ IU、蒸馏水定容至100 mL；B₁保存液配方：NaCl 0.7800g、KCl 0.0200g、CaCl₂ 0.0210g、NaHCO₃ 0.0021g、蒸馏水定容至100mL；B₂保存液配方：NaCl 0.7800g，KCl 0.0200g，CaCl₂ 0.0210g，NaHCO₃ 0.0021g，青霉素200×10⁴ IU，蒸馏水定容至100mL；C₁保存液配方：葡萄糖2.90g，KCl 0.05g，CaCl₂ 0.02g，NaHCO₃ 0.21g，蒸馏水定容至100mL；C₂保存液配方：葡萄糖2.90g，KCl 0.05g，CaCl₂ 0.02g，NaHCO₃ 0.21g，青霉素200×10⁴ IU，蒸馏水定容至100mL；D₁保存液配方：NaCl 0.743g，KCl 0.278g，CaCl₂ 0.029g，MgCl₂·6H₂O 0.030g，NaHCO₃ 0.042g，蒸馏水定容至100mL；D₂保存液配方：NaCl 0.743g，KCl 0.278g，CaCl₂ 0.029g，MgCl₂·6H₂O 0.030g，NaHCO₃ 0.042g，青霉素200×10⁴ IU，蒸馏水定容至100mL；E₁保存液配方：NaCl 0.6903g，KCl 0.0946g，CaCl₂ 0.0300g，MgCl₂·6H₂O 0.0142g，Na₂HPO₄ 0.0540g，NaHCO₃ 0.3999g，络氨酸0.0996g，甘氨酸0.0412 g，牛血清白蛋白0.4110g，蒸馏水定容至100mL；E₂保存液配方：NaCl 0.6903g，KCl 0.0946g，CaCl₂ 0.0300g，MgCl₂·6H₂O 0.0142g，Na₂HPO₄ 0.0540g，NaHCO₃ 0.3999g，络氨酸0.0996g，甘氨酸0.0412g，牛血清白蛋白0.4110g，青霉素200×10⁴ IU，蒸馏水定容至100mL；（2）精液采集：用毛巾擦干成熟黑尾近红鲌雄鱼并排除尿液和粪便，避免精液污染；轻压腹部，用吸管收集挤出的精液，采集过程避免阳光或紫外线照射；（3）精液存放：将采集的黑尾近红鲌精液置于经灭菌消毒的干燥、洁净且密封的容器中，精液与精子保存液的体积比为1：5～10，采集结束后将盛有精液和保存液的容器置3～5℃低温避光保存。