主权项 |
采用732阳离子树脂精制桦褐孔菌粗多糖的方法,其特征是,包括如下步骤:A.原料的脱脂预处理:取干燥的桦褐孔菌菌核,粉碎,置于4‑8倍体积的60‑95%乙醇溶液中浸泡16‑24 h,以除去脂肪、部分单糖及脂溶性色素,残渣阴凉处风干;B.热水浸提制备粗多糖:预处理后的残渣风干后,加10‑20倍蒸馏水(v/w),沸水提取1‑3 h, 80‑120目纱布过滤,滤渣重复提取1‑3次,合并滤液,浓缩,离心,喷雾干燥得粗多糖;C.粗多糖酶解:粗多糖加水溶解后配制为0.5‑2.0%(w/w)的水溶液,加入木瓜蛋白酶,木瓜蛋白酶加入量为粗多糖水溶液的3‑5%(w/w),35‑45℃反应20‑40 min,得粗多糖的酶解液;D.大孔吸附树脂732阳离子树脂处理:粗多糖的酶解液加入经预处理的732阳离子树脂层析柱中,按照732阳离子树脂︰粗多糖酶解液=1.2‑2.0︰1(w/v),流速控制在1‑3 ml/min,收集流出液;所述的预处理是指,大孔吸附树脂732阳离子树脂先用水浸泡24 h,用水洗至水液澄清,倾去水后加1 M HC1溶液浸泡24 h,水洗至中性,加1 M NaOH溶液浸泡24 h,用水洗至中性;E.超滤去除小分子:采用超滤膜分子量为1万的中空纤维素膜进行超滤,去除1万以下的小分子物质,得桦褐孔菌多糖样品;F.真空冷冻干燥;制备桦褐孔菌多糖:所述真空冷冻干燥是指,先将桦褐孔菌多糖样品放置于‑20℃下3 h,然后转入‑80℃下冷冻6 h以上,然后转入真空冷冻干燥机干燥,得精制的桦褐孔菌多糖。 |