一种被毛孢发酵培养方法

摘要

本发明公开了一种被毛孢发酵培养方法，包括：将米根霉种子液接入含有金铁锁和玉竹的米根霉固态发酵培养基中培养，然后置于交变磁场环境中再培养，得米根霉固态发酵产物，再经亚临界水萃取，得到米根霉发酵亚临界萃取物Ⅰ；将被毛孢种子液接入含有萃取剩余物Ⅱ的被毛孢液体发酵培养基中培养，得到被毛孢发酵产物Ⅲ；组合物为米根霉发酵亚临界萃取物Ⅰ和被毛孢发酵产物Ⅲ，具有良好的护肝功能。该方法能够有效地将各原料中的营养成分和有效成分进行生物降解和转化，有助于提高最终产品中活性成分的含量和活性。

主权项

一种中国被毛孢发酵培养方法，其特征在于，包括步骤：(1)取活化后的中国被毛孢菌种接种到液体MRS培养基中培养4天‑15天，离心收集第一菌体；将第一菌体悬浮在含胆盐的液体MRS培养基中于18℃‑30℃孵育1h‑20h，离心收集第二菌体；将第二菌体经PBS缓冲液清洗干净后重新悬浮于液体MRS培养基中，震荡摇匀得到第二菌体液，将第二菌体液接种到含胆盐的液体MRS培养基中于18℃‑30℃再培养2天‑20天，得到中国被毛孢种子液；(2)取活化后的米根霉菌种接种到液体MRS培养基中培养3h‑30h，离心收集第三菌体，将第三菌体悬浮在含NaCl的液体MRS培养基中于20℃‑30℃孵育0.5h‑15h，离心收集第四菌体；将第四菌体经PBS缓冲液清洗干净后重新悬浮于液体MRS培养基中，震荡摇匀得到第四菌体液，将第四菌体液接种到含NaCl的液体MRS培养基中于20℃‑30℃培养3h‑30h，得到米根霉种子液；(3)将步骤(2)的米根霉种子液接入米根霉固态发酵培养基中，在20℃‑30℃培养3天‑30天，然后置于交变磁场环境中再培养5天‑20天，培养产物经真空冷冻干燥、粉碎后得米根霉固态发酵产物；所述米根霉固态发酵培养基中含有金铁锁和玉竹；(4)将步骤(3)的米根霉固态发酵产物经亚临界水萃取，得到米根霉发酵亚临界萃取物Ⅰ，萃取后所剩的残渣经真空冷冻干燥后得到萃取剩余物Ⅱ；(5)将步骤(1)的中国被毛孢种子液接入中国被毛孢液体发酵培养基中，调pH值为3‑7，在15℃‑25℃培养5天‑25天，离心，得到中国被毛孢发酵产物Ⅲ；所述中国被毛孢液体发酵培养基中含有萃取剩余物Ⅱ；中国被毛孢发酵培养组合物为米根霉发酵亚临界萃取物Ⅰ和中国被毛孢发酵产物Ⅲ。