一种基于γ-聚谷氨酸接枝多巴胺@壳聚糖复合胶束的免疫传感器的制备方法

摘要

本发明公开了一种基于γ-聚谷氨酸接枝多巴胺@壳聚糖复合胶束的免疫传感器的制备方法，该制备方法包括大分子胶束的制备，大分子胶束修饰电极的制备，免疫传感器的制备三大步骤。本发明制备的大分子胶束具有很好的生物相容性，大分子胶束在免疫传感器的应用，可以有效提高抗体的固定量并很好的保持生物大分子的活性，所构建的免疫传感器具有高特异性、稳定性好、检测范围宽等优点；大分子自组装技术与电化学传感器的结合，可广泛应用于免疫分析并拓展应用于食品安全、生物医药及环保监测等领域。

主权项

一种基于γ‑聚谷氨酸接枝多巴胺@壳聚糖复合胶束的免疫传感器的制备方法，其特征在于大分子胶束的制备、大分子胶束修饰电极的制备、免疫传感器的构建，具体步骤如下：(1)大分子胶束的制备将壳聚糖溶液逐滴加入到40～50倍其体积的γ‑聚谷氨酸接枝多巴胺溶液中，以500～1000rpm的转速搅拌，使壳聚糖与γ‑聚谷氨酸接枝多巴胺溶液通过静电作用自组装形成大分子胶束，继续以500～1000rpm的转速搅拌5h～12h，使胶束聚合物组装完全；将所得大分子胶束溶液通过孔隙800nm的针式过滤器，得到粒径均匀分布的大分子胶束溶液即γ‑聚谷氨酸接枝多巴胺@壳聚糖复合胶束溶液；(2)大分子胶束修饰电极的制备将所述大分子胶束溶液通过滴涂、电泳沉积的方法修饰在传感电极表面，形成粒子膜，室温晾干，制得大分子胶束修饰电极；所述电极为金电极、铂电极、玻碳电极或ITO玻璃电极；(3)免疫传感器的构建将制得的大分子胶束修饰电极浸入氯金酸水溶液中，通过恒电位还原氯金酸在电极表面修饰纳米金粒子；再将纳米金修饰的电极浸入含抗体的磷酸盐缓冲溶液中与抗体结合；最后将结合抗体的电极浸入牛血清蛋白溶液中以封闭非特异性结合位点，即制得免疫传感器。