改良型腈水合酶

摘要

本发明提供催化活性提高了的改良型腈水合酶，并且提供编码该改良型腈水合酶的DNA、包含该DNA的重组载体、包含该重组载体的转化体、从该转化体的培养物中提取的腈水合酶及其制造方法。还提供使用了该培养物或该培养物的处理物的酰胺化合物的制造方法。一种改良型腈水合酶，其特征在于，其为β亚基中包含序列号50(GX₁X₂X₃X₄DX₅X₆R)所示的氨基酸序列的腈水合酶；X₄为选自由半胱氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺、脯氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸和苏氨酸所组成的组的氨基酸。

主权项

一种改良型腈水合酶，其特征在于，其为如下(a)、(b)或(c)的腈水合酶：(a)α亚基由序列号4所示的氨基酸序列组成，且β亚基由序列号2所示的氨基酸序列在从N末端开始数第48位上发生置换的氨基酸序列组成的腈水合酶，所述第48位上发生的置换为色氨酸被选自由天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺、脯氨酸、丝氨酸和苏氨酸所组成的组的氨基酸置换；(b)α亚基由序列号4所示的氨基酸序列组成，且β亚基由序列号2所示的氨基酸序列从N末端开始数第17位的脯氨酸变异为甘氨酸、第57位的丝氨酸变异为甲硫氨酸、第107位的苏氨酸变异为赖氨酸、第114位的赖氨酸变异为酪氨酸、第167位的天冬酰胺变异为丝氨酸、第219位的缬氨酸变异为丙氨酸、并在第48位上发生置换的氨基酸序列组成的腈水合酶，所述第48位上发生的置换为色氨酸被选自由半胱氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺、脯氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸和苏氨酸所组成的组的氨基酸置换；(c)α亚基由序列号38所示的氨基酸序列组成，且β亚基由序列号37所示的氨基酸序列在从N末端开始数第48位上发生置换的氨基酸序列组成的腈水合酶，所述第48位上发生的置换为色氨酸被甲硫氨酸或天冬酰胺置换。