从孔石莼中分离纯化制备酚酸和生物碱的方法与用途

摘要

本发明是一种从孔石莼中分离纯化制备酚酸和生物碱的方法：向孔石莼干粉末加入无水甲醇制得蒸干物，再加入蒸馏水制得上清液；将上清液调pH后加入乙酸乙酯多次萃取制得组分A B C D；将其甲醇溶液点样于硅胶GF₂₅₄上，合并收集相同R_f处条带溶解于丙酮，经离心和减压浓缩，制备到11种组分，其中的4种组分再次以划线法点样于硅胶GF₂₅₄上进行纯化制备，制备到6种组分。13种组分为生物碱和酚酸。可用于抑制米氏凯伦藻或者中肋骨条藻的生长。本发明方法可操作性强，制得的酚酸和生物碱纯度高，实现了从孔石莼中提取制得酚酸和生物碱的突破。该方法制得的多种酚酸和生物碱具有海藻抑藻活性，具有实际应用价值。

主权项

一种从孔石莼中分离纯化制备酚酸和生物碱的方法，其特征在于，其步骤如下：(1)向孔石莼干粉末加入无水甲醇，常温超声波下提取2h，过滤和减压蒸干，制备到蒸干物；将蒸干物加入蒸馏水，充分振荡，4℃下静置过夜，离心、过滤，去除沉淀，得上清液；(2)将上清液调pH至11，加入乙酸乙酯萃取；所得上层减压蒸干，获得组分A，将所得下层调节pH至7，乙酸乙酯萃取，所得上层减压蒸干，制备到组分B，再将所得下层pH调节至2，乙酸乙酯萃取，所得上层和下层分别减压蒸干，获得组分C和组分D；将组分A、B、C、D分别溶解于无水甲醇中，得到4种甲醇溶液；(3)将所得的4种甲醇溶液点样于硅胶GF₂₅₄上，组分A、组分B和组分C的甲醇溶液以体积比为15:3:2的氯仿/丙酮/甲酸为展开剂，组分D的甲醇溶液以体积比为8:1的氯仿/甲醇为展开剂；展开后，紫外254nm下观察；组分A甲醇溶液出现1个斑点，R_f为0.550；组分B甲醇溶液出现4个斑点，R_f为0.356、0.466、0.687和0.872；组分C甲醇溶液出现4个斑点，R_f为0.550、0.663、0.775和0.894；组分D的甲醇溶液出现2个斑点，R_f分别为0.216和0.585；在此基础上，以划线法多次点样，合并收集相同R_f处条带，重新溶解于丙酮，经离心和减压浓缩，制备到11种组分，和前述斑点对应依次记为组分A₁、组分B₁、组分B₂、组分B₃、组分B₄、组分C₁、组分C₂、组分C₃、组分C₄、组分D₁和组分D₂；其中，组分B₄、组分C₄、组分D₁和组分D₂再次以划线法点样于硅胶GF₂₅₄上进行纯化制备，以体积比为18:1:3的氯仿/丙酮/甲酸为展开剂，制备到6种组分，依次记为组分B₄₁、组分B₄₂、组分C₄₁、组分C₄₂、组分D₁₁和组分D₂₁；(4)经化合物定性检测、波长扫描和薄层层析检测，13种组分物质中，组分D11和组分D21是生物碱，组分A₁、组分B₁、组分B₂、组分B₃、组分C₁、组分C₂、组分C₃、组分B₄₁、组分B₄₂、组分C₄₁、组分C₄₂为酚酸；分别减压蒸干，即得。