朝鲜蓟试管实生苗茎尖快繁育苗的方法

摘要

本发明公开一种朝鲜蓟试管实生苗茎尖快繁育苗的方法。本发明利用种子消毒后进行试管内播种，获得大量无菌实生苗；并采取合适大小的试管实生苗茎尖进行从芽诱导获得继代无根苗；将无根苗进行生根培育获得朝鲜蓟优质种苗。因朝鲜蓟种皮坚硬，对消毒剂有较强的耐受力，因此用本发明的消毒剂消毒后无污染率可达80％以上；且进行适当的物理处理后的种子消毒后发芽率可达到85％以上。获得的无菌实生苗采取其茎尖进行诱导，成活率可达到90％，丛芽诱导成功率可达85％；且进行试管播种成苗后无需再消毒，成功率可达90％以上，无疑达到快繁种苗并降低成本的目的。本发明的方法具有种苗快繁效率高、成本低、前景好等优势。

主权项

一种朝鲜蓟试管实生苗茎尖快繁育苗的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)将朝鲜蓟(Cynara scolymus L.)种子进行物理处理后，再经消毒剂消毒，然后在种子培养基中进行试管内播种、培育，将培育发芽的种子挑出至新鲜的种子培养基中进行自然光照，获得无菌实生苗；(2)在无菌条件中进行如下操作，将步骤(1)获得的无菌实生苗切取0.7～1.0mm的实生苗茎尖转入丛芽诱导培养基中进行诱导，再转入自然光照下进行培养，获得丛芽，然后将丛芽转至继代培养基中，经继代培养后获得无根苗；(3)将步骤(2)获得的无根苗转至试管生根培养基中，进行试管生根培育获得朝鲜蓟优质种苗；步骤(2)中所述的丛芽诱导培养基的组成为MS培养基+6‑BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L+KT 0.2mg/L+琼脂6.8g/L+蔗糖30g/L，pH 5.6；步骤(2)中所述的继代培养基的组成为MS培养基+NAA 0.2mg/L+6‑BA1.0mg/L+CM 50g/L+卡拉胶7g/L+蔗糖30g/L，pH 5.5～5.7；或者，MS培养基+GA₃0.5mg/L+6‑BA 1.5mg/L+CM 50g/L+卡拉胶7g/L+蔗糖30g/L，pH 5.5～5.7；步骤(3)中所述的试管生根培养基的组成为1/2MS培养基+IBA 0.5mg/L+香蕉泥50g/L+活性炭2g/L+琼脂6.8g/L+蔗糖20g/L，pH5.5～5.8；或者，1/2MS培养基+IBA 0.2mg/L+香蕉泥30g/L+活性炭2g/L+琼脂6.8g/L+蔗糖20g/L，pH5.5～5.8；步骤(2)中所述的诱导的条件为黑暗条件下23～28℃诱导培养10～15天；步骤(1)中所述的物理处理的条件为黑暗条件下30～35℃恒温浸泡12～24h；步骤(1)中所述的种子培养基的组成为MS培养基+GA₃1.0mg/L+活性炭2g/L+卡拉胶(6.8～7)g/L+蔗糖30g/L，pH 5.5～5.7。