一种从野生黄芩里提取黄芩苷的工艺方法

摘要

本发明属于天然有机化学领域，涉及一种从大兴安岭野生黄芩里提取黄芩苷的方法，特别是涉及一种采用生物酶解、超声波提取、聚酰胺-大孔树脂联用技术，得到高纯度黄芩苷的新方法。本发明优点：提取方便快捷，纯化效果明显，可以工业化生产。1、应用生物酶解技术，使细胞内有效成分充分溶出。2、采用超声波提取技术，有效成分受热时间降低，活性损失少，产品生物活性高。3、聚酰胺-大孔树脂联用技术结合使用，使有效成分更加纯化，树脂可重复使用，生产成本大大降低，可以工业化使用。本发明利用生物酶解技术使有效成分尽可能溶出，再用超声波提取，最后经聚酰胺-大孔树脂二级纯化技术，再经过重结晶，将黄芩苷纯度提高到98.6％。

主权项

采用生物酶解、超声波提取、聚酰胺‑大孔树脂联用技术，得到高纯度黄芩苷的方法，其步骤如下：(1)酶解：黄芩根粉碎至10‑20目，采用复合纤维素酶，酶用量为底物的0.5‑1％，酶解温度40‑50℃，保温沉淀2‑4h；(2)超声提取：加入70％、75％或80％体积浓度的乙醇，超声波提取，超声频率50‑80KHZ，料液比1:8‑10，超声时间50‑80min，薄层层析检测分析，回收乙醇，得粗提液；(3)过滤：将提取液经4℃静置4‑6h，过滤得上清液；(4)聚酰胺初步精制：将所得上清液拌入干燥的聚酰胺粉末，先以水洗去水溶性杂质，再用20％、40％、60％、80％体积浓度乙醇依次洗脱，收集洗脱液，得提取液；(5)聚酰胺‑大孔树脂联用纯化：将提取液水浴蒸至近干，加少量乙醇与1/4‑1/6药材用量的聚酰胺粉拌合，水浴挥去溶剂，将聚酰胺放置底部铺有棉花的渗漉筒中，水洗脱至无色，取出铺在填充于3倍至5倍于药材用量的大孔树脂上，湿法装柱，树脂柱的高径比为5:1—8:1，流速为3‑5BV/h；(6)乙醇洗脱：在常温常压下，以1‑3BV/h流速，用乙醇液洗脱，洗脱体积为5‑7BV；(7)重结晶：取纯化的黄芩苷按一定的量加甲醇，加热溶解，趁热抽滤，放置过夜，析出结晶，过滤，分离晶体；将剩余物用如上方法加热溶解，重结晶，如此反复两次，得到精制的黄芩苷，纯度在98％以上。