一种蟾酥药材中吲哚类生物碱成分的检测方法

摘要

本发明提供一种蟾酥药材中吲哚类生物碱成分指纹图谱的检测方法，包括主要步骤为：供试品溶液及对照品溶液的制备、测定，并获得供试品溶液和对照品溶液的液相色谱图进行比较后，根据相对保留时间，确定供试品溶液中2种吲哚类生物碱成分，根据色谱峰面积，采用外标法确定供试品溶液中2种吲哚类生物碱成分的含量。本发明可以对蟾酥中2种主要的吲哚类生物碱成分同时进行有效的定性和定量分析，方法简便、可行、准确，测定方法的精密度、重复性、稳定性良好，能够有效地控制蟾酥质量，并为蟾酥的临床用药提供参考。

主权项

一种蟾酥药材中吲哚类生物碱成分的检测方法，包括以下步骤：1)供试品溶液的制备：将蟾酥细粉加入乙醇水溶液，超声提取后，冷却、摇匀；离心，吸取上清液加热蒸干，加入溶剂溶解并定容，过滤膜，取续滤液作为供试品溶液；所述加入的乙醇水溶液为50％乙醇水溶液，为蟾酥细粉的100‑800倍量；所述超声提取时间为20‑60min；2)对照品溶液的制备：将5‑羟色胺和蟾毒色胺对照品加入溶剂溶解并定容，摇匀，得到混合对照品溶液；所述步骤1)或2)中，所述溶解并定容时使用的溶剂为20％乙醇水溶液；3)定性检测：采用高效液相色谱法分别测定供试品溶液和对照品溶液，将获得的供试品溶液的液相色谱图，与对照品溶液的液相色谱图进行比较，根据相对保留时间，确定供试品溶液中2种吲哚类生物碱成分；4)定量检测：采用高效液相色谱法分别测定供试品溶液和对照品溶液，根据色谱峰面积，采用外标法确定供试品溶液中2种吲哚类生物碱成分的含量；所述高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱：Alltima C₁₈色谱柱；柱温：25‑35℃；检测波长：275nm；流速：0.7‑0.8ml/min；进样量：10μl；流动相：乙腈‑0.5％磷酸二氢钾缓冲溶液、磷酸调缓冲溶液pH至3.2，其中，A相为乙腈，B相为0.5％磷酸二氢钾水溶液；分析时间：25min；等度洗脱；所述等度洗脱在0‑25min，以流动相A相：B相体积比为5：95进行洗脱。