肿瘤抗原靶向性DC细胞的制备方法

摘要

本发明涉及一种肿瘤抗原靶向性DC细胞的制备方法，利用抗体能分别与肿瘤抗原和DC细胞表面FC受体结合的特性，DC细胞就能通过抗体特异性地摄取肿瘤细胞碎片，从而实现对肿瘤细胞特异性抗原的摄取和递呈。与DC细胞直接与肿瘤细胞裂解物共孵育的方法相比，这种方法对肿瘤细胞抗原的摄取具有特异性，效率更高，从而诱导出更强更多的肿瘤杀伤性淋巴细胞。

主权项

肿瘤抗原靶向性DC细胞的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：步骤一，取新鲜手术切除的肿瘤组织，剪碎，研磨，过滤，反复冻融，离心，将肿瘤组织制备成肿瘤组织裂解物；步骤二，从肿瘤患者的外周血获取外周血单个核细胞(PBMC)，使用Ficoll淋巴细胞分离液分离PBMC，取贴壁细胞用于培养DC细胞，加入含GM‑CSF、IL‑4和自体血浆的无血清培养基培养；步骤三，DC细胞通过抗体摄取抗原，具体步骤为：DC细胞培养的第0‑5天，加入抗体与DC细胞结合，去除未结合的抗体后添加GM‑CSF、IL‑4和肿瘤组织裂解物；步骤四，24小时后加入DC细胞促成熟剂(含10ng/ml LPS，500IU/ml TNFa)和2％自体血浆促进DC细胞的成熟；步骤五，24小时后生理盐水洗涤收集DC细胞。