一种生物素化ATPS的表达方法

摘要

本发明提供一种生物素化ATPS的表达方法。该方法将一种生物素受体蛋白编码基因(ATG GCT TTC TCT CTG CGT TCT ATC CTG GAA GCT GGT AAA ATG GAA CTG CGT AAC ACC CCG GGT GGT TCT)构建于大肠杆菌表达载体中，获得重组表达载体；再将酿酒酵母ATPS编码基因构建于该重组表达载体中生物素受体蛋白编码基因的下游，转化大肠杆菌宿主细胞并进行诱导表达培养。按照本发明提供方法表达的生物素化ATPS均以可溶形式存在，产量达到26.7～35.6mg/100mL培养基，比活力达到5.9×10⁴～6.8×10⁴U/mg，能够有效地和连接着亲和素的磁珠结合，并用于焦磷酸测序反应。

主权项

一种生物素化ATPS的表达方法，其特征在于：所述表达方法通过使用一种由23个氨基酸残基组成的生物素受体蛋白，将上述生物素受体蛋白的编码基因构建到大肠杆菌表达载体中，获得一种携带上述生物素受体蛋白编码基因的重组表达载体，当ATPS的编码基因插入到上述重组表达载体中生物素受体蛋白编码基因的下游时，能够表达该生物素受体蛋白和ATPS的融合蛋白，表达的融合蛋白能够在大肠杆菌细胞内被生物素化修饰；其中，所述的生物素受体蛋白的序列为SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列。