一种团头鲂组织中氯硝柳胺残留标准物质的制备方法

摘要

本发明公开了一种团头鲂组织中氯硝柳胺残留标准物质的制备方法，其步骤：A、选取不含氯硝柳胺的团头鲂；B、将氯硝柳胺投放到水中；C、将团头鲂放入含有氯硝柳胺的水体中浸泡后，用蒸馏水冲洗团头鲂的体表；D、从新鲜团头鲂的尾静脉处取血液，收集血浆，冷冻保存；E、将采集完血液的团头鲂体表的鳞片去掉，分别取团头鲂的肝脏、肌肉组织，冷冻保存；F、团头鲂血浆样品的前处理；G、团头鲂肝脏样品的前处理；H、团头鲂肌肉样品的前处理；对团头鲂血浆、肝脏和肌肉组织中氯硝柳胺残留标准物质的浓度进行定值，并进行均匀性与稳定性检验，制备出团头鲂血浆、肝脏和肌肉组织中氯硝柳胺残留标准物质。

主权项

一种团头鲂组织中氯硝柳胺残留标准物质的制备方法，其步骤是：A、选取300 g～400 g已确认不含氯硝柳胺的团头鲂，在水族箱内养一周，用于制备团头鲂组织中氯硝柳胺残留标准物质，淡水养殖条件，水温为24℃～26℃，pH为7.9～8.1，连续充气，溶解氧值≥5.0 mg/L；B、将9.0 mg氯硝柳胺溶解在5 mL的二甲基甲酰胺中，再将其投放到320 L水中，水体中氯硝柳胺的浓度为0.028 mg/L，将团头鲂放到水体中进行浸泡，浸泡过程中不饲喂任何饲料；C、将团头鲂放入含有氯硝柳胺的水体中浸泡110－130 h后，取出团头鲂，用蒸馏水冲洗团头鲂的体表2－4次；D、预先用1%质量和体积比肝素钠水溶液润洗过的注射器，从新鲜团头鲂的尾静脉处取血液，并将采集的血液放入事先用1%肝素钠水溶液润洗过的离心管中，4000 r/min，离心5 min，收集上层血浆，制备出血浆中氯硝柳胺标准物质，于干净的10 mL离心管中，‑20℃冷冻保存；E、将采集完血液的团头鲂体表的鳞片去掉，分别取新鲜团头鲂的肝脏、肌肉组织，将采集的团头鲂的背部肌肉，去皮后切成小块，用匀浆机将团头鲂肌肉匀质，制备出肌肉中氯硝柳胺标准物质，‑20℃冷冻保存；将采集的肝脏组织放于塑料封口袋中，用手在袋外将袋内肝脏组织碾碎，混匀后制备出肝脏中氯硝柳胺标准物质，‑20℃冷冻保存； F、团头鲂血浆样品前处理：取1 mL血浆样品，加入4 mL氨化乙腈pH 8~12，涡旋振荡28－32s，超声提取9－11min，加入1.5 g无水硫酸镁，涡旋振荡28－32s，7000 r/min，离心4－6min，转移上层液体至10 mL离心管中，向原试管中再加入4 mL氨化乙腈重复提取一次，合并于10 mL离心管中，置50℃氮吹仪上，氮吹至干，加入1 mL70%体积比乙腈水溶液定容，再加入50 mg C18 ODS粉，涡旋振荡28－32s ，离心4－6min，过0.22 μm有机系滤头，获得从血浆中提取、净化后含氯硝柳胺供HPLC‑MS/MS检测的液体；G、团头鲂肝脏样品的前处理：取1g肝脏样品，加入4 mL氨化乙腈，涡旋振荡28－32s，超声提取9－11min，加入1.5 g无水硫酸镁，涡旋振荡28－32s，7000 r/min，离心4－6min，转移上层液体至10 mL离心管中，向原试管中再加入4 mL氨化乙腈重复提取一次，合并于10 mL离心管中，置50℃氮吹仪上，氮吹至干，加入1 mL 70%乙腈水溶液定容，再加入50 mg C18 ODS粉，涡旋振荡28－32s，离心论坛4－6min，过0.22 μm有机系滤头，获得从肝脏中提取、净化后含氯硝柳胺可供HPLC‑MS/MS检测的液体；H、团头鲂肌肉样品的前处理按照一种检测水产品中氯硝柳胺的前处理试剂盒及方法进行，获得从肌肉中提取、净化后含氯硝柳胺供HPLC‑MS/MS检测的液体；I、团头鲂血浆、肝脏、肌肉样品中氯硝柳胺的定值方法，采用高效液相色谱串联质谱法进行测定，HPLC‑MS/MS仪器条件按照一种检测水产品中氯硝柳胺的前处理试剂盒及方法条件进行设定，获得团头鲂血浆、肝脏、肌肉组织中氯硝柳胺的残留量。