一种通关藤的快速繁殖方法

摘要

本发明公开一种通关藤的快速繁殖方法，属于植物无性繁殖技术领域。该方法包括选用通关藤当年新生梢为外植体，用流水冲洗、洗衣粉水浸泡、乙醇溶液浸泡及用质量分数浓度为0.1％氯化汞溶液浸泡11～12min后，进行诱导培养、增殖培养、壮苗培养及生根培养。本发明方法诱导率达88％以上，每月可增殖2.5倍左右，生根率达95％以上，整个繁殖周期仅需64天～72天，实现了通关藤的无性繁殖，适宜规模化生产。

主权项

一种通关藤的快速繁殖方法，其特征在于：(1)外植体的选择与灭菌处理选取无病虫害的通关藤当年新生梢，剪成带一个芽的单芽茎段为外植体，按如下顺序进行初步灭菌：用流水冲洗2.5h，放入质量分数为5％洗衣粉水中浸泡5min，流水条件下冲洗25min；将经过初步灭菌处理过的通关藤茎段用体积分数为75％乙醇溶液浸泡1min，然后用质量分数为0.1％氯化汞溶液浸泡11～12min后，再用无菌水洗涤3～5次，用无菌纸吸干茎段表面水分备用；(2)诱导培养将步骤(1)经灭菌处理的外植体切成长度为0.5cm～1.0cm带有一个芽的茎段接种于诱导培养基中，培养条件为：温度25℃士2℃，光照强度2000‑2500Lx，光周期为12h/12h，空气相对湿度保持在70％～80％；所述的诱导培养基为：MS+6‑BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖25g/L+琼脂7.1g/L，pH5.8；(3)增殖培养诱导培养形成的芽长到2～3cm时，切取带有一个芽的茎段，接种于增殖培养基中，培养条件与步骤(2)相同；所述的增殖培养基为：MS+6‑BA1.0mg/L+NAA0.3mg/L+蔗糖25g/L+琼脂7.1g/L，pH5.8；(4)壮苗培养将增殖培养形成的增殖苗分切成带一个芽的茎段，接种于壮苗培养基中，培养条件与步骤(2)相同；所述的壮苗培养基为：MS+6‑BA1.0mg/L+NAA0.3mg/L+NH₄NO₃0.66g/L+NaH₂PO₄0.56g/L+K₂SO₄1.78g/L+香蕉100g/L+蔗糖25g/L+琼脂7.1g/L，pH5.8；(5)生根培养步骤(4)的苗长到1.5cm以上时，剪切成长为0.8cm～1.2cm、至少带一个芽的茎段接种于生根培养基中，培养条件与步骤(2)相同；所述的生根培养基为：1/2MS+6‑BA0.5mg/L+IAA0.2mg/L+蔗糖25g/L+琼脂7.1g/L，pH5.8，待生根并长出4～5片新叶时炼苗移栽。