一种高效的丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种高效的丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫检测试剂盒。它主要包括酶标板、抗HCV-cAg酶结合物、HCV-cAg标准品梯度溶液、阳性血清对照指示样本、阴性血清对照指示样本、HCV-cAg样品稀释液、底物液A、底物液B、终止液、20×浓缩洗涤液。本发明制得的试剂盒灵敏度高、精密度好、特异性强。

主权项

一种高效的丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫检测试剂盒，它主要包括酶标板、抗HCV‑cAg酶结合物、HCV‑cAg标准品梯度溶液、阳性血清对照指示样本、阴性血清对照指示样本、HCV‑cAg样品稀释液、底物液A、底物液B、终止液、20×浓缩洗涤液，其特征在于：所述HCV‑cAg样品稀释液的配方及制法是：将羊血清100ml、氯化钠10g、硫柳汞10g、亚铁氰化钾42.24g、聚氧乙烯月桂醚10g、庆大霉素10g加入到0.1M pH=7.4的Tris‑HCl缓冲液中至1L，物质充分溶解后过滤除菌，2‑8℃保存；所述20×浓缩洗涤液的配方及制法是：将2.96g NaH₂PO₄ ·2H₂O、29g Na₂HPO₄ ·12H₂O、10g氯化钠、10g十二烷基硫酸三乙醇胺加入到去离子水中至1L，充分溶解后，过滤除菌，2‑8℃保存；所述底物液A是通过下述方法制备的：将12.11gTris、1g铁氰化钾、5g焦磷酸钠和1mL30%双氧水依次溶于1L蒸馏水中，使用HCL调整PH到7.4，混合均匀；所述底物液B是通过下述方法制备的：将5 g TMB溶解到10 mL二甲基亚砜中，再将其混合液加入蒸馏水中至1L，最后依次加入2.96g NaH₂PO₄ ·2H₂O和29g Na₂HPO₄·12H₂O溶解完成制备；所述酶标板为各孔包被有4μg/ml的包被抗体Mab1和Mab2的聚苯乙烯96圆孔酶标板；所述抗HCV‑cAg酶结合物为辣根过氧化酶标记的羊抗人的Mab3和Mab4抗体；所述HCV‑cAg标准品梯度溶液分为5个浓度，分别为40ng/m L、20ng/m L、10ng/m L、5ng/m L、80pg/mL；所述终止液为2ml浓盐酸和2ml浓硫酸。