一种枯草芽孢杆菌生产抗菌肽的后提取工艺

摘要

本发明涉及一种枯草芽孢杆菌生产抗菌肽的后提取工艺，属于生物技术领域，以枯草芽孢杆菌为生产菌株，通过对发酵液的离心、膜分离、喷雾干燥处理制备抗菌肽成品，采用两个连续离心机离心，再经过分级膜分离，可最大限度去除菌体和杂蛋白，得到活性较高的抗菌肽，利用了抗菌肽的耐热性，通过喷雾干燥技术，使抗菌肽快速干燥，提高了抗菌肽制备效率，且麦芽糊精作为辅料具有溶解性好、稳定性高、不宜吸潮变质、含有丰富微量元素和矿物质等优点，本发明分离纯化抗菌肽活性高，成本低廉，工艺简单，后期处理损耗较低。

主权项

一种枯草芽孢杆菌生产抗菌肽的后提取工艺，其特征在于：所述后提取工艺包括依次进行的放罐、离心、膜分离、调节pH值和喷雾干燥步骤；所述放罐步骤中：调节发酵罐压力为0.1MPa，储料罐压力为零，发酵液在储料罐中的储存时间为2小时；所述离心步骤中：离心机的转速为12000rpm，离心机的处理量为1 m³/h；所述膜分离步骤中：将离心后的上清液进行分级过滤，分级过滤包括四级过滤，第一级过滤采用50万分子量陶瓷膜，第二级过滤采用35万分子量陶瓷膜，第三级过滤采用15万分子量陶瓷膜，第四级过滤采用5万分子量陶瓷膜；过滤温度：40℃，操作压力：进口压力为0.35MPa；出口压力0.2MPa，上清液以0.5m³/h的流速沿着陶瓷膜的表面流过；所述调节pH值步骤中：收集膜分离后的清液，调整pH值至3.5，静置24h后，滤除上层上清液得到含沉淀物的浓缩液，重复滤除操作直至浓缩液体积为调整pH值前上清液体积的50%；所述喷雾干燥步骤中：在浓缩液中加入25%麦芽糊精作为赋型剂搅拌均匀后，按照50 L/h的处理量进行喷雾干燥得到抗菌肽干粉，所述喷雾干燥的进风温度为180℃，出风温度为90℃；所述后提取工艺还包括药敏检测步骤，药敏检测步骤中：药敏试验检测培养基的有效成分包括：取蛋白胨1g、酵母膏0.5g、氯化钠 1g、葡萄糖 0.5g和琼脂1.5g，蒸馏水定容至100mL，充分溶解，115℃高压灭菌30min；所述抗菌肽干粉的抑菌效价与放罐前发酵液中抗菌肽的抑菌效价相比，下降率为8%。