一种用于检测I型和IV型马疱疹病毒的双重Eva Green实时荧光定量PCR检测试剂盒及其应用

摘要

本发明公开了一种用于检测I型和IV型马疱疹病毒的双重Eva Green实时荧光定量PCR检测试剂盒及其应用。本发明的试剂盒以Eva Green作为荧光染料，同时还含有用于检测I型和IV型马疱疹病毒的双重反应液。利用获得的阳性克隆质粒和提取的病毒基因组DNA作为模板，对使用本发明的试剂盒的双重Eva Green荧光定量PCR的敏感性，特异性等进行了评价。结果表明使用本发明的试剂盒对I型马疱疹病毒（EHV-1）和IV型马疱疹病毒（EHV-4）进行双重Eva Green荧光定量PCR检测，具有快速、可靠、敏感性高等特点，并且可在单一反应中同时检测EHV-1和EHV-4，对隐性感染马具有较高的阳性检出率，可实现对马鼻肺炎的早期诊断与防治。

主权项

一种用于检测I型和IV型马疱疹病毒的双重Eva Green实时荧光定量PCR检测试剂盒，含有Eva Green作为荧光染料，其特征在于所述的试剂盒中还含有用于检测I型和IV型马疱疹病毒的双重反应液，其中所述的双重反应液中含有用于检测马疱疹病毒I型的引物对以及用于检测马疱疹病毒IV型的引物对，用于检测马疱疹病毒I型的引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.1及SEQ ID NO.2所示，用于检测马疱疹病毒IV型的引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.3及SEQ ID NO.4所示。