发明名称 | 一种用于长牡蛎亲子鉴定的微卫星多重PCR方法 | ||
摘要 | 本发明公开了一种用于长牡蛎亲子鉴定的微卫星多重PCR方法,该方法包括如下步骤:提取亲本和子代DNA;使用18个微卫星位点及带荧光标记的M13(-21)通用引物,对提取的DNA样本进行多重PCR扩增;对扩增产物的荧光信号进行检测,获得亲本和子代基因型数据;对亲本和子代进行亲缘关系鉴定。经验证,使用本发明2组多重PCR组合对12个长牡蛎全同胞家系进行亲子鉴定,即可达到100%的鉴定成功率。本发明为长牡蛎提供了一套经济有效、准确度高的基于DNA标记的亲子鉴定技术。通过微卫星标记鉴定获得的系谱关系记录,可以将长牡蛎个体追溯到其产出地,从而建立牡蛎产品的跟踪与溯源技术,为解决当今社会人们日益关注的食品安全问题提供有力的技术支持。 | ||
申请公布号 | CN105441576A | 申请公布日期 | 2016.03.30 |
申请号 | CN201610018599.0 | 申请日期 | 2016.01.12 |
申请人 | 中国海洋大学 | 发明人 | 李琪;刘婷;于红 |
分类号 | C12Q1/68(2006.01)I | 主分类号 | C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 | 青岛海昊知识产权事务所有限公司 37201 | 代理人 | 孙洪叶 |
主权项 | 一种用于长牡蛎亲子鉴定的微卫星多重PCR方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)提取长牡蛎亲本和子代个体的DNA;(2)长牡蛎多态性微卫星引物的筛选:根据引物筛选软件以及现有文献记载的长牡蛎引物序列,合成引物,并通过对长牡蛎个体进行PCR扩增,筛选出扩增稳定、特异性强的引物,所述引物包括正向引物、反向引物以及通用引物,所述通用引物上带有荧光标记;(3)对步骤(1)得到的长牡蛎亲本和子代个体的DNA进行多重PCR扩增:对步骤(2)中筛选得到的引物进行组合,并通过优化PCR反应条件得到6组多重PCR组合;(4)获得长牡蛎亲本和子代的基因型数据:对步骤(3)得到的多重PCR扩增产物进行荧光信号检测,从而获得亲本和子代的基因型数据;(5)通过基因序列分析软件对上述得到的基因型数据进行分析对比,以对长牡蛎亲本和子代进行亲缘关系鉴定。 | ||
地址 | 266100 山东省青岛市崂山区松岭路238号 |