一种新型耐热双功能糖苷水解酶MtCel2及其编码序列和应用

摘要

本发明是一种新型热稳定的嗜热毁丝菌Myceliophthora thermophila双功能糖苷水解酶MtCel2及其编码序列和应用。通过RT-PCR方法从嗜热毁丝菌中获得DUF4360超家族糖苷水解酶基因MtCel2，将其克隆并插入到毕赤酵母整合表达载体pPIC9K中，然后将得到的糖苷水解酶基因MtCel2表达载体pPIC9K/MtCel2导入到毕赤酵母GS115中，再从中筛选出一种表达糖苷水解酶基因MtCel2的酵母工程菌GS-MT-Cel2，其表达产生的糖苷水解酶MtCel2对纤维素和木聚糖均具有很高的内切水解酶活性。MtCel2具有良好的热稳定性和很强的水解纤维素能力，可广泛用于纤维废料及其它工业领域，具有重大经济价值和社会价值。

主权项

一种新型嗜热毁丝菌(Myceliophthora thermophila)DUF4360超家族双功能糖苷水解酶MtCel2及其编码序列和应用，其特征是该水解酶是一种尚未报道的热稳定内切糖苷水解酶，具有良好的纤维素酶和木聚糖酶水解活性。通过RT‑PCR方法从嗜热毁丝菌获得DUF4360超家族糖苷水解酶基因MtCel2,将该基因克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K,获得表达重组质粒pPIC9K/MtCel2,转化毕赤酵母GS115,从中筛选出表达热稳定糖苷水解酶基因MtCel2的毕赤酵母工程菌株GS‑MT‑Cel2，其表达产生的糖苷水解酶MtCel2对纤维素和木聚糖均具有很高的内切水解酶活性；其中，所述嗜热毁丝菌DUF4360超家族糖苷水解酶MtCel2的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。