鱼精蛋白的纯化工艺

摘要

本发明涉及制药领域，特别是涉及蛋白的纯化领域，更为具体的说涉及预警蛋白的纯化工艺。为了解决现有技术中鱼精蛋白纯度低的问题。本发明通过反向硅胶填料的层析分离方式，通过洗脱液中水相和有机相的比例调节，一步层析就可以除去鱼精蛋白中的非功能性杂质蛋白。不仅提高了产品的质量，达到国际水平，符合美国药典（USP）、英国药典(BP)的相关规定，而且提高了产品的安全性。

主权项

鱼精蛋白的纯化工艺，其特征是包括以下步骤：a．将鱼精蛋白溶解于pH4.0~5.0的缓冲溶液中，过滤，取清液，得到鱼精蛋白样品；b．选择反向柱；c．将鱼精蛋白上样，并用pH4.0~5.0的缓冲溶液平衡反相层析柱；d．分阶段洗脱：A相，pH4.0~5.0的缓冲溶液，B相，pH4.0~5.0的有机缓冲溶液，所述B相中有机溶剂浓度为以体积百分比计10~20%，所述有机溶剂选自乙腈、甲醇、乙醇，第一阶段，洗脱液B为15%~20%，等度洗脱，收集洗脱液Ⅰ，第二阶段，洗脱液B为25%~35%，等度洗脱，收集洗脱液Ⅱ，第三阶段，洗脱液B为100%，等度洗脱，收集洗脱液Ⅲ；e．取洗脱液Ⅱ，加入稀硫酸，再加入95%乙醇溶液，过滤，取沉淀；f．收集步骤e中沉淀，干燥，得鱼精蛋白纯化产品。