山药多糖的分离纯化方法

摘要

本发明公开了一种山药多糖的分离纯化方法，包括前处理、热水水浴浸提、Sevage法除蛋白、采用高速逆流色谱法进行粗分多糖和SephadexG-100层析柱进一步纯化等步骤。本发明确定了山药多糖的提取工艺流程和工艺参数，确定了高速逆流色谱及Sephadex G-100纯化山药多糖的色谱条件，并鉴定了所提山药多糖的结构，测定了山药多糖的抗氧化和抑菌活性。

主权项

山药多糖的分离纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）前处理：将新鲜山药洗净，切片，50℃下烘箱中干燥，干燥后的山药片用粉碎机粉碎成山药粉；（2）热水水浴浸提：在步骤（1）所得山药粉中加入水，使料水比为1: 8.59 g/ml，在pH值为 8.9、提取温度76.79℃条件下，提取1.38 h得提取液，提取液离心后取上清液；（3）Sevage法除蛋白：采用6次Sevage法去除步骤（2）所得上清液中的蛋白质；（4）采用高速逆流色谱法对步骤（3）所得脱蛋白后的上清液进行粗分多糖：以12.5% PEG1000，8% KH₂PO₄、8% K₂HPO₄、71.5% H₂O作为高速逆流色谱分离山药多糖的溶剂系统；色谱条件为：转速700 r/min，流速2.5 mL/min；（5）SephadexG‑100层析柱对步骤（4）粗分后多糖进一步纯化：层析柱大小为1.0×100 cm，色谱条件为：以水作为流动相，上样浓度3 mg/mL，洗脱流速为0.2 mL/min，收集洗脱液，得山药多糖产品。