一种金纳米粒子探针比色法检测久效磷残留的方法

摘要

本发明公开了一种金纳米粒子探针比色法检测久效磷残留的方法，由制备金纳米粒子、测定金钠米粒子溶胶的紫外吸收光谱、比色探针法检测久效磷的残留、抗干扰等研究步骤组成。本发明利用金纳米粒子的等离子共振吸收光学性质及久效磷农药能使乙酰胆碱酯酶的活性受到抑制而无法催化底物碘化硫代乙酰胆碱（ATChI）的水解反应，随之，底物会与金纳米粒子结合进而提高了金纳米粒子的聚集程度。农药浓度的不同，使得乙酰胆碱酯酶受抑制的程度不同，最终体系的颜色也就不同，根据此原理构建以金纳米粒子比色探针为依托的农药残留快速检测体系，本检测体系对食品中常见的物质具有较高的选择性，利用橘皮为原料制备的金纳米粒子绿色环保，降低成本。

主权项

一种金纳米粒子探针比色法检测久效磷残留的方法，由下述步骤组成：（1）制备金钠米粒子将新鲜柑橘成熟果实的外皮烘干后粉碎，过40目筛，浸泡于去离子水中，橘子皮与去离子水质量比为1：10，浸泡1‑2小时，再将浸泡液于4000 rpm条件下，离心3分钟，取上清液，此上清液作为浸泡液母液；采用去离子水将浸泡液母液稀释1倍获得所需工作液，冰箱4℃条件下保存；室温条件下，将4℃、浓度为1g/ml的氯金酸溶液置于反应皿中，伴随磁力搅拌器温和搅动100‑150rpm；2分钟后，迅速将工作液加入氯金酸溶液中，氯金酸溶液与工作液的体积比为3:1‑6:1，随即观察颜色的变化，即由黄色变为紫色再变为浅酒红色，当体系颜色出现浅酒红色时，搅拌速度提升到300‑350rpm，10 分钟后结束反应，获得金纳米粒子溶液，金纳米粒子溶液颜色为浅酒红色，置于冰箱4℃保存备用；（2）测定金钠米粒子的紫外吸收光谱吸取步骤（1）所制备的金纳米粒子溶液，加入到比色皿中，再加入去离子水，金纳米粒子溶液与蒸馏水体积比为1:2，混合均匀后，置于紫外‑可见光分光光度计中测定吸光度，测得结果金纳米粒子吸收峰在520‑550nm；（3）比色探针法检测久效磷残留底物的预处理：首先选择碘化硫代乙酰胆碱作为反应底物，采用去离子水配置10 mM的ATChI溶液100 mL，向5ml 的ATChI溶液中加入18 mg硝酸银粉末，充分振荡10秒钟，竖直静置1分钟后离心去沉淀，取上清液，再向上清液中加入1 mg 氯化钠，充分振荡10秒钟，竖直静置1分钟后离心去沉淀，取上清液，此时上清液为含有ATCh⁺的溶液；金纳米粒子比色法的建立：分别向离心管中加入无菌水，久效磷工作液和乙酰胆碱酯酶缓冲液后等待10 分钟，再加入ATCh⁺溶液，等待10分钟后，加入金纳米粒子溶液，记录颜色变化，伴随着久效磷浓度的提高，颜色逐渐由浅酒红色转变至紫色再变为深蓝色。