大兴安岭野生金老梅总三萜提取物的制备方法

摘要

本发明属于天然有机化学领域，涉及一种从大兴安岭野生金老梅里提取、纯化总三萜的方法，特别是涉及一种采用高压脉冲电场提取技术、聚酰胺藕联大孔树脂吸附纯化总三萜的方法。本发明优点：1、高压脉冲电场提取技术利用细胞膜电穿孔原理，在瞬间使植物细胞破壁，达到细胞膜电位混乱，细胞有效组分快速流出的目的。具有处理时间短，能耗低，不易引起处理产物变性等优点，并且工艺简便易行；2、聚酰胺藕联大孔树脂吸附纯化技术，能很好的富集总三萜，进一步纯化有效成分。树脂易处理、分离速度快、制备量大、费用低等优点，可以工业化使用。本发明利用上述技术所得总三萜含量高、活性高，纯度最高可达96.1％。

主权项

一种利用高压脉冲电场技术提取、聚酰胺藕联大孔树脂吸附纯化总三萜的方法，其步骤如下：(1)前处理：取新鲜金老梅叶或干燥好的叶子，清洗备用；(2)高压脉冲电场提取：乙醇溶液浓度为50％、60％、70％，液料比为1∶10‑15，电场强度20‑40kV/cm、脉冲数5‑8，处理时间3‑5分钟；(3)精滤处理：采用聚四氟乙烯膜，过滤精度为0.2μm、0.3μm，在温度50℃、55℃、60℃和0.2MPa、0.3MPa的压力下精滤处理；(4)聚酰胺柱层析：采用80‑200目的聚酰胺树脂装柱，控制提取液与聚酰胺用量比1∶5‑7，室温下以3BV/h、4BV/h、5BV/h流速吸附饱和；解吸时先用水除杂，再用浓度为60％、65％、70％、75％、80％、85％乙醇溶液解吸，控制流速，收集洗脱液，检测总三萜含量；(5)聚酰胺与大孔树脂树脂联用纯化：取处理过的聚酰胺树脂铺在大孔树脂柱上，大孔树脂型号为HPD100、XDA‑6、HPD‑722的任意一种，径高比为1∶5‑7，过上步所得洗脱液；上样液质量浓度为1.0‑3.0mg/mL，上样速率1‑3BV/h，先用2BV去离子水冲洗树脂，再用浓度为75％、80％、90％的乙醇溶液，以1‑3BV/h流速洗脱，收集洗脱液，检测总三萜含量；(6)真空冷冻干燥：收集总三萜溶液，预冻温度‑15至‑30℃，工作压力20‑40Pa，升华温度45‑55℃，解析温度55‑65℃，得总三萜粉末；(7)检测：采用高效液相色谱法，紫外检测器在一定波长进行检测，金老梅总三萜纯度为95％以上。