一种基于磁珠法的抗体纯化方法

摘要

本发明公开一种基于磁珠法的抗体纯化方法，其将蛋白A磁珠加入含有抗体的载液体系，使抗体和磁珠相结合，体系平衡后，外加磁场，使磁珠载目的抗体被磁场固定，弃去体系液体，达到固液分离，移除外加磁场再加入洗涤液冲洗磁珠，再次外加次出场，使磁珠载目的抗体被磁场固定，弃去液体，移除外加磁场再加入洗脱液冲洗磁珠，外加磁场移除磁珠，即可得到纯净的抗体，再次加入保存缓冲液，平衡抗体所需pH及离子环境，以达到长时间保存条件。本发明通过控制使用的磁珠用量，适用于不同大小的纯化体系，既可以适用于实验室的小体系试制，又可以适用于工厂大量制备的大体系生产。且可以应用于自动化实验和生产，提高操作效率，节省人工操作。

主权项

一种基于磁珠法的抗体纯化方法，其特征是：其包括以下步骤：步骤1、将蛋白A包被的磁珠加入含有抗体的载液体系中，搅拌均匀，室温下孵育5～60min，使磁珠在溶液中呈均匀分布状态，在此过程中磁珠与抗体结合；上述蛋白A包被的磁珠为免疫磁珠；步骤2、步骤1中的体系平衡后，外加磁场，使磁珠载抗体被磁场固定，弃去体系液体，进行固液分离，使抗体和杂质分离纯化；步骤3、移除外加磁场，加入洗涤缓冲液冲洗磁珠2～4次，清洗抗体表面杂质；重复步骤2～3一次；步骤4、移除外加磁场，加入洗脱缓冲液冲洗磁珠2～4次，使抗体和磁珠分离；步骤5、外加磁场移除磁珠，即得到纯化后的抗体；步骤6、向纯化后的抗体加入保存缓冲液，平衡抗体所需pH及离子环境，达到长时间保存条件。