一种液体发酵中试生产粉红粘帚霉厚垣孢子的方法

摘要

本发明属于微生物技术领域，提供了一种液体发酵中试生产粉红粘帚霉厚垣孢子的方法，包括培养基配方和发酵参数控制。由蔗糖40-50克/升、豆饼粉20-25克/升、磷酸二氢钾0.5-2克/升、硫酸镁0.2-1克/升、硫酸锌0.01-0.5克/升及水组成的液体培养基，发酵生产粉红粘帚霉HLD-1厚垣孢子，接种量0.2％-2％(体积比)，培养条件pH4-6，温度26℃-30℃，搅拌速度180-250转/分，通气量1∶0.2-0.8。培养时间从接种开始计算，8小时孢子萌发，24-40小时形成大量厚垣孢子。液体发酵3-5天，厚垣孢子浓度达到1.5×10⁸个/毫升。本发明的目的是提供一种较廉价、原料来源丰富的培养基配方及高效、易于调控的液体发酵技术，利用这种方法能够实现粉红粘帚霉HLD-1厚垣孢子稳定规模化生产，为其大面积的生防应用提供保证。

主权项

一种液体发酵中试生产粉红粘帚霉厚垣孢子的方法，其特征在于，所述粉红粘帚霉菌种选择HLD‑1菌株，保藏号为CGMCC No.1037；培养基由蔗糖40‑50克/升、豆饼粉20‑25克/升、磷酸二氢钾0.5‑2克/升、硫酸镁0.2‑1克/升、硫酸锌0.01‑0.5克/升及水组成；发酵条件为接种量0.2％‑2％，发酵过程pH4‑6，温度26℃‑30℃，搅拌速度180‑250转/分，通气量1:0.2‑0.8，发酵时间3‑5天；发酵方法为：发酵罐中先放入250升自来水，将蔗糖、豆饼粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、硫酸锌按上述比例依次加入发酵罐中，再补加自来水至300升；打开电机搅拌，直至各组分完全混合均匀，加入磷酸调节pH为6；121℃高压湿热灭菌30分钟，待灭菌培养液冷却至室温时，按1％体积比的量接入HLD‑1摇瓶种子液，种子液浓度为10⁸孢子/毫升，27℃培养72小时后，得到含厚垣孢子的发酵液，厚垣孢子浓度为1.5×10⁸个/毫升。