发明名称 基于磁珠绑定的二代测序文库快速构建方法
摘要 本发明提供一种基于磁珠绑定的二代测序文库快速构建方法,其在构建文库的中间过程不进行洗脱。根据本发明,即使以微量样本作为起始,也能够构建高质量二代测序用DNA文库。
申请公布号 CN105420818A 申请公布日期 2016.03.23
申请号 CN201510792358.7 申请日期 2015.11.17
申请人 安诺优达基因科技(北京)有限公司 发明人 张介中;王旺;刘伟;玄兆伶;李大为;梁峻彬;陈重建
分类号 C40B50/06(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C40B50/06(2006.01)I
代理机构 北京坤瑞律师事务所 11494 代理人 闫桑田
主权项 一种基于磁珠绑定的二代测序文库快速构建方法,其包括:步骤A:将希望进行测序的DNA片段进行末端修复并进行磁珠纯化,得到平末端DNA片段,且不洗脱与磁珠结合的平末端DNA片段;步骤B:将所述平末端DNA片段进行3'端加A,得到3'端加A的DNA片段,且不进行纯化;步骤C:将所述3'端加A的DNA片段加接头并进行结合液纯化,得到加接头DNA片段,且不洗脱与磁珠结合的加接头DNA片段;和步骤D:将所述加接头DNA片段进行PCR扩增,得到扩增产物,对所述扩增产物进行结合液纯化,并洗脱与磁珠结合的所述扩增产物。
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