同时检测迟缓爱德华氏菌和鮰爱德华氏菌的荧光探针PCR方法

摘要

本发明涉及微生物的检测方法和检测试剂盒，具体涉及一种同时检测迟缓爱德华氏菌和鮰爱德华氏菌的荧光探针PCR检测方法，所述的方法包括：利用特异性探针和引物对，以细菌DNA为模板进行实时荧光PCR反应，其特征在于:所述引物对分别为Seq ID No.1、Seq ID No.2、Seq ID No.3和Seq ID No.4 所示的序列；Seq ID No.1: 5’-CTGCCAAGCAGGGACGTAA-3’Seq ID No.2: 5’-CGAGGAGAGCATCTTGTCGAA-3’Seq ID No.3: 5’-TCCATTCGTCTGTGCGACAA-3’Seq ID No.4: 5’-AAAACACGTTCGGATGGATTG-3’所述探针为能与迟缓爱德华氏菌或鮰爱德华氏菌的基因组DNA位于所述引物对之间的序列相同或互补的核苷酸序列，并且所述探针的5’端和3’端分别标记有荧光报告基团和荧光淬灭基团；所述探针为Seq ID No.5和Seq ID No.6所示的序列,Seq ID No.5：5’-ATCCTCAACGTCGAGAAGGCGCG-3’Seq ID No.6：5’-CACTATGAGGGTGGGATCAAGGCGTTT-3’。

主权项

一种用于同时检测迟缓爱德华氏菌和鮰爱德华氏菌的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒含有能扩增出迟缓爱德华氏菌和鮰爱德华氏菌的基因片段的引物对，所述引物对分别为Seq ID No.1、Seq IDNo.2、Seq IDNo.3和Seq IDNo.4所示的序列：Seq ID No.1:5’‑CTGCCAAGCAGGGACGTAA‑3’Seq ID No.2:5’‑CGAGGAGAGCATCTTGTCGAA‑3’Seq ID No.3:5’‑TCCATTCGTCTGTGCGACAA‑3’Seq ID No.4:5’‑AAAACACGTTCGGATGGATTG‑3’所述探针为能与迟缓爱德华氏菌或鮰爱德华氏菌的基因组DNA位于所述引物对之间的序列相同或互补的核苷酸序列，并且所述探针的5’端和3’端分别标记有荧光报告基团和荧光淬灭基团；所述探针为Seq ID No.5和Seq ID No.6所示的序列,5’‑ATCCTCAACGTCGAGAAGGCGCG‑3’5’‑CACTATGAGGGTGGGATCAAGGCGTTT‑3’。