发明名称 |
一种重组表达人谷氨酸脱羧酶的毕赤酵母基因工程菌 |
摘要 |
本发明公开了一种重组表达人谷氨酸脱羧酶的毕赤酵母基因工程菌,属于基因工程技术领域。本发明将人谷氨酸脱羧酶基因GAD<sub>65</sub>与载体pPICZα连接构建表达载体pPICZα-hGAD<sub>65</sub>,电转至毕赤酵母X-33中,获得过量表达人谷氨酸脱羧酶(GAD<sub>65</sub>)的重组菌株。本发明的重组菌株经摇瓶发酵、Tricine-SDS-PAGE和Western Blot鉴定,证实人源谷氨酸脱羧酶(GAD65)实现了诱导表达,通过对发酵上清液进行分离纯化得到融合蛋白,经过蛋白浓度测定,蛋白hGAD<sub>65</sub>浓度达到2.36g/L。 |
申请公布号 |
CN105400813A |
申请公布日期 |
2016.03.16 |
申请号 |
CN201510997621.6 |
申请日期 |
2015.12.28 |
申请人 |
江南大学 |
发明人 |
刘立明;罗秋玲;刘佳 |
分类号 |
C12N15/81(2006.01)I;C12N1/19(2006.01)I;C12N9/88(2006.01)I;A61K38/51(2006.01)I;A61P3/10(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N |
主分类号 |
C12N15/81(2006.01)I |
代理机构 |
哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 |
代理人 |
耿晓岳 |
主权项 |
一种高效活性表达人的谷氨酸脱羧酶的方法,其特征在于,所述方法是构建以毕赤酵母为宿主表达核苷酸序列如SEQ ID NO:1所述的谷氨酸脱羧酶的重组菌,然后以该重组菌发酵生产人的谷氨酸脱羧酶。 |
地址 |
214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号 |