一种酒精性脂肪肝斑马鱼模型的构建方法

摘要

本发明公开了一种酒精性脂肪肝斑马鱼模型的构建方法。步骤如下：实验室驯养AB系野生型斑马鱼，挑选出健康成年斑马鱼随机均分为16组；采用中心组合设计的方法，设计乙醇浓度、暴露时间、试验周期；各组成年斑马鱼按照设计条件完成饲养后，计算该组成年斑马鱼的存活率和平均脂滴面积；将得到的16组存活率和平均脂滴面积分别进行标准差标准化，将各组的存活率标准化值和平均脂滴面积标准化值相加然后除以2得该组成年斑马鱼的综合评分；将各组综合评分进行多元回归分析和二项式拟合得到回归方程，根据回归方程确定酒精性脂肪肝斑马鱼模型的最优造模条件。本发明成本低、周期短，能够深入研究酒精性脂肪肝病理机制，为酒精性脂肪肝寻找新的治疗手段。

主权项

一种酒精性脂肪肝斑马鱼模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，实验室驯养AB系野生型斑马鱼，挑选出健康成年斑马鱼用来构建模型；步骤2，采用中心组合设计的方法设计实验条件，将挑选出的成年斑马鱼随机分为16组，每组数量相等；所设计的实验条件包括5个乙醇浓度X₁、5个暴露时间X₂、5个试验周期X₃，对16组成年斑马鱼分别按照设计的实验条件对应进行饲养；步骤3，各组成年斑马鱼按照该组对应的实验条件完成饲养后，剔除死亡个体计算该组成年斑马鱼的存活率，并取出存活的各成年斑马鱼麻醉后取肝组织进行HE染色，做病理切片确定各条成年斑马鱼的脂滴面积，最终确定该组成年斑马鱼的平均脂滴面积；步骤4，将步骤4得到的16组成年斑马鱼的存活率和平均脂滴面积两个指标分别进行标准差标准化得各组的存活率标准化值和平均脂滴面积标准化值，再将各组的存活率标准化值和平均脂滴面积标准化值相加然后除以2得加权平均值即该组成年斑马鱼的综合评分；步骤5，将各组成年斑马鱼的综合评分进行多元回归分析和二项式拟合得到回归方程，根据回归方程描绘三维曲面图以确定酒精性脂肪肝斑马鱼模型的最优造模条件即乙醇浓度X₁、暴露时间X₂、试验周期X₃的最优解。