固定相为聚甲基丙烯酸甲酯连二氧化钛的液相开管柱及其制作方法和应用

摘要

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种固定相为聚甲基丙烯酸甲酯连二氧化钛的液相开管柱及其制作方法和应用。本发明中，首先预处理一段200-500 μm外径，5-20 μm内径的石英毛细管，在石英毛细管内壁键合上硅烷偶联试剂3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷，在所得的石英毛细管内壁聚合生成聚甲基丙烯酸甲酯，再在聚合物上原位反应生成二氧化钛颗粒；将制作好的固定相为聚甲基丙烯酸甲酯连二氧化钛的液相开管柱用于β-casein酶解液中磷酸化肽段的富集，并利用MALDI-TOF MS进行磷酸化肽段和非磷酸化肽段的检测。本发明的液相开管柱可作为纳升体积样品以下、甚至单细胞分析的一类色谱柱。

主权项

一种固定相为聚甲基丙烯酸甲酯连二氧化钛的液相开管柱的制作方法，其特征在于具体步骤为：（1）对长度为5‑30 cm、外径为200‑500 μm、内径为5‑20 μm的石英毛细管进行清洗处理；（2）将20‑40%（v/v）硅烷偶联试剂3‑(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷通入经步骤（1）处理的石英毛细管中，在100‑150 ℃下加热反应5‑24 h；（3）将20‑40%（v/v）聚合液甲基丙烯酸甲酯通入步骤（2）所得石英毛细管中，70‑90 ℃下加热反应5‑24 h；（4）将5‑100 mg/mL的Ti(SO₄)₂溶液通入步骤（3）所得石英毛细管中，90‑120 ℃下水热反应5‑24 h，得到固定相为聚甲基丙烯酸甲酯连二氧化钛的液相开管柱。