GX1修饰的阴离子脂质体腺病毒载体及其制备方法与应用

摘要

本发明提供了一种GX1修饰的阴离子脂质体腺病毒载体及其制备方法与应用，通过将荧光素标记的肽GX1和CH₃O-PEG2000-COOH加入到纯净水中反应、提纯得到修饰后的聚合物GX1-PEG2000；将磷脂、琥珀酸胆固醇单酯以及胆固醇溶于氯仿中，干燥，将得到的干膜水化，然后超声处理，得到阴离子脂质体；通过钙诱导相变方法将腺病毒负载在阴离子脂质体上，得到载有腺病毒的阴离子脂质体；最后将聚合物GX1-PEG2000与载有腺病毒的阴离子脂质体混合培养，得到GX1修饰的阴离子脂质体腺病毒载体。本发明阴离子脂质体腺病毒载体能显著抑制胃癌SGC-7901细胞的迁移；并能抑制SGC-7901细胞、血管内皮细胞的人脐静脉内皮细胞的增殖，表明它可以抑制肿瘤新生血管，防止肿瘤细胞的营养供应。

主权项

一种GX1修饰的阴离子脂质体腺病毒载体的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)GX1‑PEG2000聚合物的制备将荧光素标记的肽GX1和CH₃O‑PEG2000‑COOH按摩尔比1：(1～5)加入到纯净水中，37℃反应2～5小时后，将反应液提纯得到修饰后的聚合物GX1‑PEG2000；(2)阴离子脂质体的制备将磷脂、琥珀酸胆固醇单酯以及胆固醇按摩尔比5：4：1溶于氯仿中，减压蒸发干燥4～6小时，将得到的干膜在TES缓冲液中水化，然后在冰水浴条件下超声处理1min，得到阴离子脂质体AL；(3)通过钙诱导相变方法将腺病毒负载在阴离子脂质体上，得到载有腺病毒的阴离子脂质体；(4)GX1修饰的阴离子脂质体腺病毒载体的制备将步骤(1)中得到的聚合物GX1‑PEG2000与步骤(3)中得到的载有腺病毒的阴离子脂质体混合，在37℃下培养2小时后，得到GX1修饰的阴离子脂质体腺病毒载体。