用于室温原位检测生物样品中的目标核酸的方法和试剂盒

摘要

本发明涉及用于检测生物样品中的目标核酸的原位杂交方法，包括在室温下进行一个或多个方法步骤(例如，预处理、变性、杂交、洗涤)。本发明进一步涉及用于进行这种方法的试剂盒。

主权项

一种检测生物样品中的目标核酸的方法，包括步骤：a)通过用包含碱和约50％至约80％的醇的溶液接触所述样品，使包含所述目标核酸的生物样品变性；b)使至少一个探针与所述样品中的目标核酸杂交，其中所述探针：1)存在于包含约1‑10mM碱且pH为约10至约13的杂交缓冲液中，和2)包含与所述目标核酸中的核苷酸序列基本上互补的核苷酸序列和至少一个可检测标记；c)在pH为约10至约13的洗涤缓冲液中洗涤所述样品，所述洗涤缓冲液包含约1‑10mM；和d)检测已与所述样品中的目标核酸杂交的探针上的所述至少一个可检测标记，由此检测所述样品中的目标核酸，其中，步骤a)、b)和c)中的每一个均在约19摄氏度至约25摄氏度的温度下进行。