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一种观察山茶属植物花粉管的荧光显微方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)解剖分离待观察山茶属植物的雌蕊材料至操作单位；(2)将分离后的材料依次浸泡在NaClO和NaOH溶液中，直到材料透明且软化，再经水溶性苯胺蓝染液染色，采用“双载玻片贴合两面观察法”制片后，进行花粉管荧光显微观察；步骤(1)中，若所述雌蕊材料为花柱，操作单位是一根独立的花柱；若所述雌蕊材料为子房，操作单位是一列或一个着生在胎座上的胚珠；步骤(1)中，花柱解剖分离时，从花柱基部整齐切除子房，得到一根独立的花柱；子房解剖分离时，从花柱基部整齐切除花柱、果柄，留下子房，刮去子房壁，从中轴处切下每个心室，再根据每个心室内胚珠着生的方位继续切分，若胚珠左右对称着生，则从中间对称切开，使胚珠尽可能多的保留在胎座上，若胚珠不规则着生，则以单个胚珠的方式分离，使胚珠尽可能多地保留在胎座上；步骤(2)中NaClO溶液的有效氯含量为8000‑10000mg/L，NaOH溶液浓度为7‑9mol/L；步骤(2)中水溶性苯胺蓝染液质量浓度为0.2‑0.3％；步骤(2)中载玻片厚度为0.8‑1.5mm；步骤(2)中材料先在NaClO溶液中浸泡2‑3h，水洗后再在NaOH溶液中浸泡2‑3h，水洗后在水溶性苯胺蓝染液染色6‑8h，制片观察；步骤(2)中所述“双载玻片贴合两面观察法”进行制片观察的方法为：取一载玻片A，将水溶性苯胺蓝染液染色后的材料置于其上，在材料周围滴加水溶性苯胺蓝染液，取另一规格相同的载玻片B，轻盖于材料上，使两块载玻片处于贴合状态，采用“载玻片A+材料+载玻片B”的组合模式，不经压片，进行观察。 |
