发明名称 |
一种高效表达重组八因子的灌注培养方法 |
摘要 |
本发明涉及生物技术领域,特别是涉及一种高效表达重组八因子的灌注培养方法。本发明提供一种高效表达重组八因子的灌注培养方法,包括如下步骤:1)将重组FVIII细胞株的种子接种于反应器中进行批培养;2)当培养体系中葡萄糖含量为0.5-1.5g/L时,使用旋转过滤灌注方法进入灌注培养模式;3)当反应器内的细胞处于一个稳态阶段,使用声频灌流方法和旋转过滤灌注方法同时进行灌注培养,维持细胞密度在2-3*10<sup>7</sup>个/ml。本发明所提供的高效表达重组八因子的灌注培养方法采用声频灌流方法和旋转过滤灌注方法相结合灌流培养,细胞在整个稳定表达期内,成活率始终保持在90%以上,细胞密度可以达到2.5*10<sup>7</sup>个/ml左右,八因子平均表达量在18 IU/ml。 |
申请公布号 |
CN105385731A |
申请公布日期 |
2016.03.09 |
申请号 |
CN201510997991.X |
申请日期 |
2015.12.25 |
申请人 |
上海莱士血液制品股份有限公司 |
发明人 |
程露;郑继岱;陆晖;周雪峰 |
分类号 |
C12P21/02(2006.01)I;C12R1/91(2006.01)N |
主分类号 |
C12P21/02(2006.01)I |
代理机构 |
上海光华专利事务所 31219 |
代理人 |
严晨;许亦琳 |
主权项 |
一种高效表达重组八因子的灌注培养方法,包括如下步骤:1)将重组FVIII细胞株的种子接种于反应器中进行批培养;2)当培养体系中葡萄糖含量为0.5‑1.5g/L时,使用旋转过滤灌注方法进入灌注培养模式;3)当反应器内的细胞处于一个稳态阶段,使用声频灌流方法和旋转过滤灌注方法同时进行灌注培养,维持细胞密度在2‑3*10<sup>7</sup>个/ml。 |
地址 |
201401 上海市奉贤区望园路2009号 |