发明名称 用于转化腾冲嗜热厌氧杆菌MB4的质粒、培养基和转化方法
摘要 本发明公开了一种腾冲嗜热厌氧杆菌MB4(Thermoanaerobactertengcongensis MB4)的遗传转化方法。本发明还涉及用于该转化方法中的质粒、培养基、以及采用该转化方法筛选的Thermoanaerobactertengcongensis MB4转化子。另外,本发明还涉及上述质粒的构建方法。
申请公布号 CN102477442B 申请公布日期 2016.03.09
申请号 CN201010575823.9 申请日期 2010.11.30
申请人 中国科学院微生物研究所 发明人 谭华荣;刘波;杨海花;张树利
分类号 C12N15/74(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I 主分类号 C12N15/74(2006.01)I
代理机构 中科专利商标代理有限责任公司 11021 代理人 王旭
主权项 一种用于转化腾冲嗜热厌氧杆菌(Thermoanaerobacter tengcongensis)MB4的质粒,所述质粒包含如SEQ ID NO:2中划线部分所示的Thermoanaerobacter tengcongensis MB4的tte1482的启动子序列,以及与所述启动子序列可操作地连接的具有编码热稳定性蛋白酶的抗生素抗性基因,并且所述质粒以质粒pHT3101为骨架,并包含如SEQ ID NO:1所示的Thermoanaerobacter tengcongensis MB4染色体复制起点序列,T.tengcongensis MB4染色体复制起点序列ori Tte插入在质粒pHT3101多克隆位点的EcoR I和Xba I位点之间,且如SEQ ID No:2所示的T.tengcongensis MB4的tte1482的启动子Ptte1482和卡那霉素抗性基因kan<sup>R</sup>构建的融合基因插入在质粒pHT3101多克隆位点的Xba I和Pst I位点之间。
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