发明名称 一种利用自组装细胞芯片转染蛋白质或化合物的方法
摘要 本发明公开了一种利用自组装细胞芯片转染蛋白质或化合物的方法。本发明提供了自组装细胞芯片在转染蛋白质或化合物中的应用和利用自组装细胞芯片转染蛋白质或化合物的方法;其中自组装细胞芯片包括基底,在所述基底上设有用于固定所述蛋白质或化合物的区域;在所述基底上除用于固定所述蛋白质或化合物的区域外的其他区域覆盖抑制细胞生长的聚-N-异丙基丙烯酰胺膜。本发明的实验证明,本发明发现SAMcell芯片可以用来定点转染蛋白质或化合物,该方法有机结合了细胞芯片技术和定点转染技术,可以有效的应用于蛋白质或化合物的大规模筛选研究。
申请公布号 CN103966155B 申请公布日期 2016.03.02
申请号 CN201410156548.5 申请日期 2014.04.18
申请人 苏州吉诺瑞生物科技有限公司 发明人 张函槊;庄峰锋;李绍路;李娟
分类号 C12N5/07(2010.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N15/87(2006.01)I 主分类号 C12N5/07(2010.01)I
代理机构 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人 关畅
主权项 一种定点转染蛋白质的方法,包括如下步骤:1)将待转染物质通过明胶包裹得到转染复合物;所述待转染物质为蛋白质;2)将所述转染复合物固定到自组装细胞芯片上,得到固定待转染物质的芯片;所述自组装细胞芯片包括基底,在所述基底上设有用于固定所述转染蛋白质的区域;在所述基底上除用于固定所述转染蛋白质的区域外的其他区域覆盖抑制细胞生长的聚‑N‑异丙基丙烯酰胺膜;3)将目的细胞接种到所述固定待转染物质的芯片上,培养;实现所述待转染物质转染到所述目的细胞中;步骤1)中,所述将待转染物质通过明胶包裹得到转染复合物的方法包括如下步骤:将待转染物质溶液与明胶溶液混匀,孵育,得到转染复合物;步骤2)中,所述将所述转染复合物固定到自组装细胞芯片上的方法包括如下步骤:先将所述转染复合物点样在所述自组装细胞芯片上的用于固定所述转染蛋白质的区域,再进行干燥;所述待转染物质溶液为待转染物质水溶液;所述明胶溶液由明胶、纤维连接蛋白和水组成,其中明胶在溶液中的质量百分含量为0.4%,纤维连接蛋白在溶液中的质量百分含量为0.01%;步骤1)中,所述蛋白质与所述明胶的质量比为1:1×10<sup>6</sup>‑1×10<sup>8</sup>;步骤3)中,所述目的细胞和所述蛋白质的配比为1×10<sup>4</sup>‑1×10<sup>7</sup>个:1纳克;所述蛋白质为表皮生长因子或转化生长因子β;所述目标细胞为Hela细胞或含有GFP蛋白表达的Hela细胞。
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