一种提高加系大白猪IMF的遗传标记辅助选择方法

摘要

一种提高加系大白猪肌内脂肪IMF的遗传标记辅助选择方法，将过氧化物酶体增殖物激活受体PPARγ和固醇调节原件结合蛋白ADD1基因作为分子标记基因。将背最长肌烘干过筛；逐次加入缓冲液、蛋白酶K溶液、缓冲液GB、乙醇，分别混匀，水浴，离心，得絮状沉淀和溶液；将产物放入吸附柱中漂洗、洗脱、离心；根据PPARγ与ADD1引物分别对基因外显子编码区的片段进行扩增，纯化回收，并序列测定，分析多态位点和基因型，确定PPARγ和ADD1的AA-CT-TC基因型作为提高IMF的分子遗传辅助标记。本发明能提高加系大白猪IMF选育的定向性和高效性，以此提高肉质的风味和嫩度。并能准确的检测基因的单核苷酸多态性（SNP），基因分型检测准确率接近100%，同时可用于活体检测，有利于早期诊断。

主权项

一种提高加系大白猪IMF的遗传标记辅助选择方法，其特征是：将筛选的候选基因—过氧化物酶体增殖物激活受体‑γ和固醇调节原件结合蛋白基因作为分子标记基因；将背最长肌烘干、网筛过滤；逐次加入缓冲液、蛋白酶K溶液、缓冲液GB、乙醇，分别混匀，水浴，离心，得絮状沉淀和溶液；将上述产物放入吸附柱中漂洗、洗脱、离心；根据PPARγ与ADD1引物分别对PPARγ和ADD1基因外显子编码区的片段进行扩增，并对DNA片段进行纯化回收，进行序列测定，确定突变位点，分析SNP，确定PPARγ基因突变位点即DNA序列第247位，以及ADD1基因两个突变位点即DNA序列第721位和DNA序列第748位组成的AA‑CT‑TC基因型作为提高IMF的分子遗传辅助标记。