贝西沙星对映异构体的分离检测方法

摘要

本发明提供了一种实用方便、稳定可靠的手性衍生化高效液相色谱法来分离和检测贝西沙星及其对映异构体，属于分析化学领域。本发明使用2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖异硫氰酸酯(GITC)和贝西沙星在一定条件下进行衍生化反应，制备得到衍生化产品，衍生化反应可保证贝西沙星及其异构体均得到完全的衍生化，衍生化后的贝西沙星及其异构体可使用常规的反相高效液相色谱法得到分离和检测。本发明可用于贝西沙星原料药及其药物制剂产品中对映异构体的分离检测和质量控制。

主权项

一种分离检测贝西沙星对映异构体的方法，其特征在于：室温下，在1.5mL的EP管中加入10μL由浓氨水稀释100倍制得的稀氨水溶液，然后加入100μL浓度为1mg/mL的贝西沙星水溶液，放置到振荡器上振荡5min，混匀后，加入600μL的氯仿，再放置到振荡器上振荡10min，静置10min，吸取氯仿层，放入新的EP管中，加入200μL浓度为2mg/mL的2，3，4，6‑四‑O‑乙酰基‑β‑D‑吡喃葡萄糖异硫氰酸酯溶液，放置振荡器上振荡30min，室温下挥发除去溶剂，即得到贝西沙星及其异构体完全衍生化的产品；衍生化后的贝西沙星及其异构体使用常规的反相高效液相色谱法进行分离和检测，高效液相色谱的分析条件为：色谱柱为Kromasil 100‑5C18柱，250mm×4.6mm，5μm，流动相为甲醇‑pH为3.0的20mM磷酸二氢钾缓冲液，甲醇‑pH为3.0的20mM磷酸二氢钾缓冲液的体积比为72/28，流速为1.0mL/min，检测波长为293nm，柱温为30℃，进样体积为100μl；高效液相色谱的实验步骤：取贝西沙星及其异构体衍生化的产品适量，用流动相溶解，配制成以贝西沙星计每1mL含贝西沙星衍生化产品0.18mg的样品溶液，作为供试品溶液，取供试品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图。