一种抑制漆树外植体污染和褐变的方法

摘要

本发明涉及植物组培技术领域，尤其是组培中抑制外植体的污染和褐变的方法。本发明公开了一种抑制漆树外植体污染和褐变的方法，其特征在于包括使用苯扎氯铵来消毒处理漆树外植体步骤和将消毒好的材料接种在添加半胱氨酸的White培养基上暗培养的步骤。本发明的方法抑制漆树外植体的污染和防止漆树外植体的褐变。为漆树组织培养提供充足的无菌外植体，有力地保证了后续组织培养的成功率，且成本低，适于工业化生产。

主权项

一种抑制漆树外植体污染褐变的方法，包括使用苯扎氯铵来消毒处理漆树外植体步骤和将消毒好的材料接种在添加半胱氨酸的White培养基上暗培养的步骤，其特征在于具体步骤如下：（1）采取生长健壮、无病虫害的漆树1 ~ 2年生茎段或幼嫩叶片，用毛刷蘸肥皂水轻拭，刷净材料表面污物，置于烧杯中，自来水冲洗2 h；（2）转入超净工作台内，75%乙醇浸泡20 s，无菌水冲洗3 min；（3）用1%苯扎氯铵浸泡1 min，无菌水冲洗3 min；（4）用0.1%升汞消毒20 min，无菌水冲洗5 ~ 8次，每次2 min；（5）用消毒过的滤纸吸干水分，将材料切割为1 cm茎段或1cm ×1cm的方块；（6）接种于添加半胱氨酸的White培养基，比例为1 L的White培养基附加100 mg 半胱氨酸，蔗糖30 g，琼脂粉6 g，pH调节为5.8；（7）暗培养2周，温度20 ± 2℃；（8）转于光照强度1000 ~ 2000 Lux，光照时间12 h/d，温度25±2℃的培养条件下常规培养。